농도 : 300~800 ㎍/ ㎖
보존 -20℃
*Bacillus subtilis ISW 1214 주가 첨부되어 있다.
DNA 길이
4,870 bp
제품설명
Plasmid pHY300PLK는 Escherichia coli와 Bacillus subtilis의 양쪽에 DNA를 형질전환할 수 있는 shuttle vector로 E. coli plasmid pACYC177과
Streptococcus faecalis의 Plasmid pAMα1 유래의 DNA로부터 구축되어 있다.
마커는 ampicillin 내성 유전자와 tetracycline 내성 유전자로 E. coli 에서는 양쪽 모두 발현하지만 B. subtilis 중에서는 tetracycline 내성 유전자만이
발현한다.
pHY300 PLK는 Bal I, BamH I, Ban I, Bgl I, Bgl II, BstP I, EcoR I, EcoR V, Hind III,
Hpa I, Sal I, Sma I, Pvu I, Xba I의 제한효소 절단부위를 각 한 곳씩 갖고 있다.
pHY300 PLK DNA의 구조
사용상의 주의
B. subtilis의 competent cell을 이용한 형질전환 효율은 plasmid dimer의 함유량에 크게 의존한다. 따라서 형질전환 빈도를 향상시키기 위해서는 plasmid를
형질전환하기 전에 E. coli recA+ 균주에서 증폭할 필요가 있다. 또한, electroporation을 이용하여 B. subtilis로 형질전환하는 경우에는
plasmid monomer로도 충분한 형질전환 빈도를 얻을 수 있기 때문에 특별히 recA+ 균주로 증폭할 필요는 없다.
형질전환 효율
E. coli : > 2×105/ ㎍ DNA
B. subtilis : > 1×103/ ㎍ DNA (electroporation법)