보존
0.02% sodium azide를 함유하는 개시 버퍼로 평형화시켜 4℃ 보존겔을 장기간 pH2.5(0.1 M formic acid)에 방치하는 것을 피한다.
제품설명
본 제품은 소 췌장 트립신의 활성중심 Ser 잔기를 dehydro-alanine 잔기로 화학변환시킨 anhydrotrypsin(촉매활성은 상실)을 CNBr법으로 아가로스 겔에 고정화한 친화성 크로마토 그라피 (affinity chromatography)용 특이적 흡착체이다.
Anhydrotrypsin Agarose에 의한 affinity chromatography는 단백질의 protease 소화물 중에서 적당한 길이의 C-말단 펩타이드 단편을 간편히 분리할 수가 있어 C-말단의 1차 구조를 해석 하는데 유용하다.
특징
- C-말단에 Arg, Lys 또는 AECys (S-aminoethylcystein)를 갖는 펩타이드와 약산성하에서 선택적으로 결합한다(단, 유리 아미노산, 디펩타이드에는 결합하지 않는다).
- 결합 친화력은 본래의 트립신 고정화체의 친화력보다 훨씬 강하다.
- C-말단이 Arg, Lys이 아닌 단백질은 트립신 (trypsin) 소화물이 본 제품에 흡착되지 않으므로 C-말단 펩타이드를 비흡착 분획으로 회수할 수 있다.
- C-말단이 Arg, Lys인 단백질은 커모트립신 소화물이 본 제품에 흡착되므로 C-말단 펩타이드만을 흡착·용출할 수 있다.
- 결합한 펩타이드를 따로따로 용출할 수 있다.
- 흡착체를 간단히 재생할 수 있다.
- 잔존 trypsin 활성은 거의 검출되지 않는다.
결합용량
- Bz-Gly-Arg 약 60 nmol/ml wet gel
- Kunitz soybean trypsin inhibitor (STI) 약 80 nmol/ml wet gel
형상
0.02 M CaCl2와 0.02% sodium azide를 함유하는 0.05 M sodium acetate 완충액(pH5.0)에 현탁