효율적인 PCR 증폭을 위한 Pyrobest 조건설정가이드 click!
제품 설명
본 제품은 Pyrococcus sp. 유래의 3’→ 5’ exonuclease 활성(proof reading 활성)을 갖는 내열성 α형 DNA polymerase이다. Pyrococcus furiosus 유래의 Pfu DNA polymerase나 Vent DNA polymerase와 같은 정도로 정확하게 증폭할 수 있으며 Taq DNA polymerase와 동등한 증폭효율을 갖는다. 또 TaKaRa Taq 등의 Taq DNA polymerase와는 달리 Hot Start 법을 이용하지 않아도 비특이적인 증폭을 억제할 수 있다.
활성의 정의
활성화 salmon sperm DNA를 주형/primer로 이용하여 아래의 활성 측정 반응액 중에서 74℃에서 30분 동안 10 nmol의 전체 nucleotide를 산불용성 침전물로 전환하는 활성을 1 U로 한다
활성 측정용 반응액 조성
| TaKaRa Taq (5 U/㎕) |
50 ㎕ |
| 20 mM |
Tris-HCl(pH8.3, 37℃) |
| 10 mM |
KCl |
| 6 mM |
(NH4)2SO4 |
| 2 mM |
MgCl2 |
| 0.001% |
BSA |
| 각 200 μM |
dATP·dGTP·dCTP |
| 100 μM |
[3H] TTP |
내용
Pyrobest DNA Polymerase 125 U
| 10× Pyrobest Buffer |
500 ㎕ |
| MgCl2 (25 mM) |
1 ml |
| dNTP mixture |
400 ㎕ |
형상
| 50 mM |
Tris-HCl(pH8.2) |
| 0.1 mM |
EDTA |
| 1 mM |
DTT |
| 0.1% |
Tween 20 |
| 0.1% |
Nonidet P-40 |
| 50% |
Glycerol |
보존 -20℃
첨부 dNTP Mixture*
| 농도 |
각 2.5 mM |
| 형상 |
수용액(Na염) pH7~9 |
| 순도 |
각 98% 이상 |
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