제품설명
본 제품은 genomic DNA 제거과정이 추가된 Real Time RT-PCR용 역전사 시약이다.
강력한 DNA 분해 활성을 가진 gDNA Eraser에 의해 genomic DNA만을 42℃, 2분의 처리로 제거한 후, DNA 분해 활성을 완전하게 억제하는 성분을 포함한 역전사용 반응 시약을 첨가하여 15분간의 역전사 반응을 실시한다. 20분 미만의 신속한 반응으로 샘플의 손실없이 RNA로부터 qPCR용 cDNA를 합성할 수 있다.
본 제품에 의해 합성된 cDNA는 TB Green™ assay, Dual Labeled Probe Assay에 모두 사용할 수 있으며, 목적에 따라 TB Green™ Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code RR820A), Probe qPCR Mix (Code RR391A) 등 Real Time PCR 시약과 함께 사용한다.
내용 (100 회, 20 ㎕ 반응시)

1.

gDNA Eraser

100 ㎕

2.

5×gDNA Eraser Buffer *1

200 ㎕

3.

PrimeScript RT Enzyme Mix I *2

100 ㎕

4.

5×PrimeScript Buffer 2 (for Real Time) *3

400 ㎕

5.

RT Primer Mix *4

400 ㎕

6.

RNase Free dH2O

1 ㎖ x 2

7.

EASY Dilution (for Real Time PCR) *5

1 ㎖

*1 5×gDNA Eraser Buffer 성분이 그 후의 역전사 반응에 필요하기 때문에 genomic DNA 제거 반응은 반드시 진행한다.
*2 RNase inhibitor를 포함한다.
*3 dNTP mixture를 포함한다.
*4 Oligo dT Primer 와 Random 6 mers를 포함한다.
*5 total RNA나 cDNA를 단계 희석할 때 희석용액으로 사용한다. H2O나 TE buffer로 희석하면 정확한 희석을 할 수 없는 경우가 있지만, EASY Dilution을 이용하면 저농도까지 정확히 희석을 할 수 있다. 본 buffer는 역전사 반응이나 PCR의 반응성에 영향을 미치지 않으므로 희석한 주형 용액을 그대로 역전사 반응이나 PCR 반응의 주형으로서 사용할 수 있다.
EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code 9160)는 별도 구매 가능.

【주의】EASY Dilution은 Takara의 Real Time PCR 시약과 함께 사용하기를 권장하며, 타사 제품과의 호환성은 확인되지 않았습니다.
보존 -20℃
함께 사용하는 제품
<cDNA 합성부터 TB Green™ premix까지 함께 사용하면 Perfect Real Time PCR>

<Reference paper list>
논문제목

논문명

사용제품

Identification and Comparative Analysis of microRNA in Wheat (Triticum aestivum L.) Callus Derived from Mature and Immature Embryos during In vitro Culture

Front Plant Sci. 2016; 7: 1302.

RR047,
RR820

Identification of Putative ORF5 Protein of Porcine Circovirus Type 2 and Functional Analysis of GFP-Fused ORF5 Protein

PLoS One. 2015; 10(6): e0127859.

RR047,
RR820

Glucagon-like peptide-1 protects cardiomyocytes from advanced oxidation protein product-induced apoptosis via the PI3K/Akt/Bad signaling pathway

Mol Med Rep. 2016 Feb; 13(2): 1593?1601.

RR047,
RR820

Genome-wide identification of vegetative phase transition-associated microRNAs and target predictions using degradome sequencing in Malus hupehensis

BMC Genomics. 2014; 15(1): 1125.

RR047,
RR820

Antennal transcriptome analysis of the Asian longhorned beetle Anoplophora glabripennis

Sci Rep. 2016; 6: 26652.

RR047,
RR820

Identification of heat-responsive genes in carnation (Dianthus caryophyllus L.) by RNA-seq

Front Plant Sci. 2015; 6: 519.

RR047,
RR820

Heterologous Reconstitution of Omega-3 Polyunsaturated Fatty Acids in Arabidopsis

Biomed Res Int. 2015; 2015: 768478.

RR047,
RR820
주의
본 제품을 이용하여 합성된 cDNA로 TB Green™ 검출용 Real Time RT-PCR 분석을 실시하는 경우에는 아래 두 제품의 사용을 권장합니다.
본 제품과 조합해서 사용함으로써 신뢰성 높은 결과를 얻을 수 있습니다.

단, TB Green™ Fast qPCR Mix (Code RR430A/B)와의 조합은 추천하지 않습니다.