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제품설명
본 제품은 보다 더 업그레이드 시킨 PrimeSTAR HS DNA Polymerase에, 한층 더 독자적인 신장인자(elongation factor)를 첨가하여
PCR 효율을 비약적으로 향상시킨 획기적인 High Fidelity PCR 효소이다.
매우 높은 정확도를 유지하면서 지금까지의 High Fidelity PCR 효소에서는 볼 수 없었던 뛰어난 신장성을 가지고 있어,
30 kb이상의 long fragment 증폭이 가능하다. 증폭에 어려움을 겪었던 GC-rich template에 대해서도 버퍼의 변경이나 특별한
반응 조건의 설정 없이, 간단하게 증폭 성공율을 높일 수 있다. 또, 기존의 High Fidelity PCR 효소 사용시 반응이
저해되기 쉬웠던 다량핵산(template DNA 과량 첨가)을 포함한 반응에서도 template량의 허용 범위가 매우 넓어져,
예를 들어 발현량이 매우 적어, template cDNA를 과량으로 첨가할 수 밖에 없는 저발현 유전자 검출 등에 용이하게
사용할 수 있다. 상온에서 DNA Polymerase 활성 및 3＇→5＇exonuclease 활성을 억제하는 단일 클론 항체를 이용한
hot start version의 PCR 효소이다.
신장시간이 1min/kb의 표준적인 PCR 조건을 표준 반응조건으로 명시하고 있지만, 효소를 2 배 첨가하면,
신장시간 10초/kb의 고속 PCR이 가능하여, 다양한 타겟에 적용가능하다.
(PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase (Code R050A/)만 해당)
내용
PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase (Code R050A; 200 회, 50 μl 반응시)
*1
| 1. PrimeSTAR GXL DNA Polymerase (1.25 U/μl) |
200 μl |
2. 5×PrimeSTAR GXL Buffer (Mg2+ plus)*2 |
1 ml×2 |
3. dNTP Mixture (각 2.5 mM) |
800 μl |
*1 표준 프로토콜, PCR 반응액 50 μl 반응시
*2 Mg2+ 농도는 5 mM (5×) |
PrimeSTAR® GXL Premix (Code R051A; 200 회, 50 μl 반응시)
| 1. PrimeSTAR GXL Premix (2X) |
1 ml X 5 |
보존
-20℃
PCR 산물에 대하여
PrimeSTAR GXL DNA Polymerase를 이용해 증폭한 PCR 산물의 대부분은 평활 말단이다. 따라서, 그 PCR 산물을
그대로(필요에 따라서 인산화하여) 평활 말단 벡터에 클로닝하는 것이 가능하다.평활 말단 벡터로의
클로닝에는 Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End) (Code 6027)를 이용할 수 있다. T-vector에 클로닝 하는 경우는,
PCR 산물의 3' 말단에 dA를 부가해야 한다. T-vector로의 클로닝에는 Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR(Code 6019)를
이용할 수 있다.
【Direct Sequencing을 할 경우】
본 효소는 3＇→5＇exonuclease 활성을 가지고 있기 때문에, Direct Sequencing을 하기 전에 phenol/chloroform 처리등으로
단백질을 제거해야 한다.
