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탈인산화효소

Alkaline Phosphatase (Calf intestine) (CIAP)

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Takara
 2250A
 Alkaline Phosphatase (Calf intestine)
관련학술 구매하기 		1,000 U
 72,000원 
90,000원 		가격할인
02.26 ~ 04.19
 2250A_DS.v2107Da.pdf
Takara
 2250B
 Alkaline Phosphatase (Calf intestine)
관련학술 구매하기 		5,000 U (2250A x 5)
 405,000원 

제품설명
본 효소는 대장균 유래의 효소와 마찬가지로 대부분의 인산 monoester 결합을 분해하지만, 인산 diester와 인산 triester 결합은 분해하지 않는다. 또한 ATP 등의 pyrophosphate 결합의 분해속도가 느리다.
보존
-20℃
농도
30 U/㎕
형상

10 mM

 

Tris-HCl (pH8.0)

50 mM

 

KCl

1 mM

 

MgCl2

0.1 mM

 

ZnCl2

50%

 

Glycerol
첨부 buffer 구성 (10x)

500 mM

 

Tris-HCl (pH9.0)

10 mM

 

MgCl2

활성의 정의
37℃, pH9.8에서 1분간 1 μmol의 p-nitrophenol을 유리시키는 효소활성을 1 U으로 한다.
활성 측정용 반응액 조성

1 M

 

Diethanolamine (pH9.8)

0.5 mM

 

MgCl2

15 mM

 

p-nitrophenyl phosphate

사용상의 주의
본 효소는 보존 조건에서 매우 안정하지만 chelate가 존재할 때 65 ℃, 30분의 열처리로 99% 이상의 활성이 비가역적으로 실활된다.
단, 사용 조건에 따라서는 충분하지 않을 수 있으므로, gel extraction 또는 phenol-chloroform 정제를 통해 완전히 불활성화시키는 것을 추천한다.
용도
- DNA의 5’-말단 표지를 위한 전 처리, 또는 선형화된 vector의 self ligation 방지를 위한 탈인산화(dephosphorylation)
- 평활말단 (blunt end) 또는 3’-돌출말단 (3’-overhang)의 탈인산화에는 Alkaline Phosphatase (E. coli C75) (Code 2120A)을 이용한 고온 (55℃~60℃)에서의 반응이 바람직하다.
기원
Yeast carrying the plasmid which encodes the gene of calf intestine alkaline phosphatase
일반적 성질
- 분자량: 약 100,000
- Subunit: 분자량 약 50,000의 Zn2+을 포함한 2개의 당단백질
- 최적 pH
   pH10 부근 (높은 기질 농도)
   pH8 부근 (낮은 기질 농도)
- 활성화제
   Tris등 알코올 화합물, Mg2+
- 안정성
   매우 안정
    65℃, 30분의 열처리로 가역적으로 불활성화한다. 완전히 불활성화시키기 위해서는 페놀 처리가 필요하다.
관련제품
- 실험목적별로 선택하는 Cloning Kit 선택가이드 - 링크
- DNA Ligation Kit 〈Mighty Mix〉 (Code 6023)
- Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)
- Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR® (Code 6019)
- Alkaline Phosphatase (E. coli C75) (Code 2120A)
- Alkaline Phosphatase (Shrimp) (Code 2660A)

Keyword : cloning,CIAP,CIP,Calf intestine