Tet-Dual Expression System (Tet-Advanced IRES Fluorescent Vector Set)은 Tet-On Advanced와 Tet-Off Advanced 제품 중 가장 혁신적인 제품으로 매우 강력하게 유전자의 발현을 조절할 수 있을뿐만 아니라, 밝은 적색(mCherry)과 녹색 (ZsGreen1) 형광 단백질이 함께 발현 되므로 쉽게 clone을 선별할 수 있어 inducible system 구축에 필요한 시간을 대폭 감축시킨다.
두 개의 단백질이 동시에 발현되는 원리
Tet-Dual System의 핵심 요소는 하나의 mRNA transcript로부터 목적유전자와 형광단백질이 함께 발현되도록 하는 internal ribosome entry site(IRES) 이다. 진핵생물의 mRNA 번역은 거의 5＇-cap에서만 시작되지만, IRES는 내부 다른 site에서 ribosome이 결합하여 번역을 시작할 수 있도록 한다. 결과적으로 두 개의 단백질이 하나의 bicistronic mRNA transcript로부터 동시에 발현되게 된다 (Figure 1 & 2)
항상 높은 유도율
엄격한 조절 및 높은 발현 수준은 activatior와 inducible expression vector가 함께 transfection되어 형성된 세포의 수와 stable cell line의 구축 여부에 달려 있다. 따라서 더 엄격한 조절과 고발현이 필요한 경우, 각각의 vector를 독립적으로 transfection 하고, 최적 조건의 clone을 선별하는 과정도 별도로 수행하는 것이 좋다.
Figure 1. Induction with Tet-Dual simultaneously produces two proteins from a bicistronic mRNA.
Figure 2. Tet-Dual System vectors. The Tet-Dual transactivator expression vectors constitutively express either Tet-On Advanced or Tet-Off Advanced, and the fluorescent protein, ZsGreen1 (Panel A). pTRE-Dual2 is a Tet-regulated inducible expression vector that coexpresses mCherry and a second gene that is cloned in the multiple cloning site (MCS) (Panel B). pTRE-Dual1 coexpresses two user-defined genes.
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.