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Home > 전제품보기 > Inducible System · Yeast hybrid > Tet 유도 발현 시스템 > Tet-One Inducible Expression (One vector System)
All-in-one vector 형태의 Tet-inducible system

Tet-One Inducible Expression (One vector System)

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Clontech
 634301
 Tet-One Inducible Expression System
관련학술 구매하기 라이선스  		Each
 2,322,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33153, x33578
Clontech
 631844
 Lenti-X™ Tet-One™ Inducible Expression System
관련학술 구매하기 라이선스  		Each
(Package) 		3,551,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32788
Clontech
 631847
 Lenti-X™ Tet-One™ Inducible Expression System (Puro)
관련학술 구매하기 라이선스  		Each
(Package) 		3,551,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32788
Clontech
 634304
 Retro-X Tet-One Inducible Expression System
관련학술 구매하기 LMO제품  라이선스  		Each
(Package) 		3,181,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33016, x33551
Clontech
 634307
 Retro-X Tet-One Inducible Expression System (puro)
관련학술 구매하기 LMO제품  라이선스  		Each
(Package) 		3,181,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33016, x33552
Clontech
 634310
 AAVpro® Tet-One Inducible Expression System (AAV2)
관련학술 구매하기 라이선스  		Each
 1,827,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32380, x33216

특징
  • 강력하게 발현을 조절 할 수 있는 Tet-On 3G system을 기반으로 한 all-in-one vector형태
  • 낮은 백그라운드와 높은 유도발현 효율
  • 10 ng/ml의 doxycycline에도 반응하는 민감도
  • Lenti-X Tet-One: 고역가의 렌티바이러스를 제작할 수 있는 패키징 시스템 포함 (Lenti-HTX Pakaging system)
  • Retro-X Tet-One: 고역가의 레트로바이러스를 제작할 수 있는 패키징 시스템 포함 (Retro-X Universal Packaging System)
  • AAVpro Tet-One: helper-free packaging system을 사용하며, AAV Particle 추출을 위한 추출 시약 등이 포함되어있다.

Tet-One System이 개발되기 전에는 Clontech의 Tet-on, Tet-off system은 response vector와 regulatory vector(doxycycline-responsive transactivator protein)인 2개의 vector를 유전자 발현을 조절했다.

Tet-One System은 하나의 벡터에 구성요소를 모두 포함하고 있다. Tet-On 3G transactivator는 human phosphoglycerate kinase 1 promoter를 이용하여 정방향으로 발현되며, 반대 방향에는 PTRE3GS promoter를 이용하여 목적 유전자(Gene of interest)의 발현을 조절한다. 기존에 발표된 all-in-one vector system은 50~100배 정도의 유도발현 효율을 보인다. 하지만 Clontech의 Tet-One system은 all-in-one vector 형태로 최대 2500배의 유도발현 효율을 보인다.(Heinz et al, 2011).


그림. Tet-One System Mechanism - The Tet-On 3G transactivator protein is expressed constitutively from the human PGK promoter (PPGK) but is unable to bind to the TRE3G promoter (PTRE3G) in the absence of doxycycline (Dox). When bound by Dox, supplied in the culture medium, the transactivator undergoes a conformational change, binds to PTRE3G and activates transcription of a transgene cloned downstream.


그림. Seven out of eight Tet-One clones show more than 1,000-fold induction of expression. HeLa cells were infected with LVX-TetOne-Puro-Luc lentivirus (M.O.I. = 1) and eight individual clones were selected and expanded according to the protocol. Each clone was analyzed for doxycycline-induced expression of luciferase. Seven of the eight clones demonstrated more than 1,000-fold induced expression, including two clones with 5,000-fold induction, and one clone with 10,000-fold induction.


그림. The Tet-One system is highly sensitive to low levels of doxycycline (Dox). HEK 293 cells were infected with LVX-TetOne-Luc lentivirus (M.O.I.=1) and the transduced pool was treated with 10-fold dilutions of doxycycline. 48 hr after treatment, the cells were harvested, lysed, and Western-blotted using anti-luciferase antibody. Luciferase expression reached maximum levels in the presence of only 10 ng/ml Dox.
References
Heinz, N., Schambach, A., Galla, M., Maetzig, T., Baum, C., Loew R., & Schiedlmeier, B. (2011) Retroviral and transposon-based Tet-regulated all-in-one vectors with reduced background expression and improved dynamic range. Human Gene Ther. 22(2):166-176.

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