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긴 단편의 DNA / GC rich 서열 증폭

LA Taq

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Takara
 RR002A
 TaKaRa LA Taq®
관련학술 구매하기 		125 U
 132,800원 
166,000원 		가격할인
02.26 ~ 04.19
 RR002A_DS.v2110Da.pdf
Takara
 RR002B
 TaKaRa LA Taq®
관련학술 구매하기 		500 U (RR002A x 4)
 600,000원 
Takara
 RR02AG
(RR002AG)		 TaKaRa LA Taq® with GC Buffer
관련학술 구매하기 		125 U
 134,400원 
168,000원 		가격할인
02.26 ~ 04.19
 RR02AG_DS.v2110Da.pdf
Takara
 RR02BG
(RR002BG)		 TaKaRa LA Taq® with GC Buffer
관련학술 구매하기 		500 U (RR02AG x 4)
 604,000원 
Takara
 RR002M
 TaKaRa LA Taq® (Mg2+ buffer 첨부)
관련학술 구매하기 샘플신청  		250 U
 266,400원 
333,000원 		가격할인
02.26 ~ 04.19
 RR002M_DS.v1312Da.pdf


제품설명
본 제품은 LA PCR 원리를 응용한 3’→ 5’exonuclease 활성 (proof reading 활성)을 갖는 내열성 DNA polymerase이다. 일반적인 PCR 조건에서 기존의 Taq polymerase에 비하여 높은 증폭효율을 보이며, 기본적으로 어떠한 반응에도 적용할 수 있으나 특히 15 kb 이상의 증폭에 효과적이다.
또한 GC-rich 서열을 증폭하는 경우, 최적화된 buffer가 첨부된 TaKaRa LA Taq® with GC buffer (Code RR002AG/BG)를 사용하면 효과적이다.
TaKaRa LA Taq®시리즈는 반응용 buffer (Mg2+ 포함 또는 Mg2+ 별도제공) 와 dNTP mixture가 함께 제공된다.
PCR 산물
TaKaRa LA Taq을 이용하여 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3’말단에 A가 1염기 추가되어 있다. 따라서, PCR 산물을 그대로 T-vector에 cloning 할 수 있다.
단, 긴 PCR 산물(5 kbp 이상)의 T-vector에 cloning은 효율이 좋지 않다. 또한 말단평활화 및 인산화를 통해 평활말단 vector로 cloning이 가능하다
내용 (250 U)
TaKaRa LA Taq® (Code RR002A)
1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕)
25 ㎕
2. 10× LA PCR Buffer II (Mg2+ Free)
1 ㎖
3. MgCl2 (25 mM)
1 ㎖
4. dNTP Mixture (각 2.5 mM)
400 ㎕

TaKaRa LA Taq®with GC Buffer(Code RR02AG)
1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕)
25 ㎕
2. 2×GC Buffer I* (5 mM Mg2+ plus)
1.25 ㎖
3. 2×GC Buffer II* (5 mM Mg2+ plus)
1.25 ㎖
4. dNTP Mixture (각 2.5 mM)
400 ㎕
*Code RR002AG/BG에는 2종류의 buffer가 첨부되어 있다.
2×GC Buffer I을 사용하여 증폭이 되지 않는 template의 경우는 Buffer II를 사용하면 증폭 효율이 향상될 수 있다.
TaKaRa LA Taq®(Code RR002M)
1. TaKaRa LA Taq (5 U/㎕)
50 ㎕
2. 10× LA PCR Buffer II (Mg2+ plus)
1 ㎖
3. dNTP Mixture (각 2.5 mM)
800 ㎕
보존 -20℃
형상

20 mM

Tris-HCl (pH8.0)

100 mM

KCl

0.1 mM

EDTA

1 mM

DTT

0.5%

Tween 20

0.5%

NP-40

50%

Glycerol
첨부 dNTP Mixture 조성*

농도

각 2.5 mM

형상

수용액 (나트륨염), pH7~9

순도

각 98% 이상

*dATP, dCTP, dGTP, dTTP등 몰 혼합물로 희석하지 않고 그대로 PCR반응에 이용할 수 있다.
PCR 산물에 대하여
TaKaRa LA Taq®을 이용하여 증폭한 PCR 산물의 대부분은 3’ 말단에 A가 1염기 부가되어 있다. 따라서 이 PCR 산물을 그대로 T-vector pMD20 (Code 3270) 또는 T-vector pMD19 (Simple) (Code 3271)에 cloning할 수 있다. 또한 말단 평활화 및 인산화 후, 평활 말단 vector에 cloning할 수도 있다.
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Keyword : RR002AG,RR002BG
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