제품설명

본 제품은 간단한 방법으로 PCR 산물을 평활 말단 (blunt end)의 벡터에 cloning 하는 제품이다. PCR 산물의 평활 말단화 (blunting)와 5’ 말단 인산화 (5’-phosphorylation)를 동시에 진행하기 때문에 평활 말단의 PCR 산물과 dA가 추가된 PCR 산물 모두 한번의 반응으로 ligation 할 수 있다. 본 제품은 PCR 산물의 별도의 전처리 과정 없이 (예. 효소 불활성화, 잔여 dNTP 및 primer 제거 등) blunting kination 반응에 이용할 수 있다. Ligation 반응이 매우 효율적인 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ (Code 6023)을 사용하고 있기 때문에 빠르고 간단한 ligation이 가능하다. 이 제품은 PrimeSTAR^® GXL DNA Polymerase (Code R050A)와 같은 효소로 증폭된 Blunt end의 PCR 산물의 cloning에 사용할 수 있다.

내용 (20회용)

10 X Blunting Kination Buffer	40 ㎕
Blunting Kination Enzyme Mix	20 ㎕
Ligation Mighty Mix ^*1	120 ㎕
Control Vector (pUC118 Hinc II /BAP) (50 ng/㎕)	20 ㎕
Control Insert ^*2 (200 ng/㎕)	10 ㎕
ddH₂O	340 ㎕

^*1 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞(Code 6023)에 포함된 시약과 동일
^*2 λDNA을 주형으로 TaKaRa Ex Taq^®에서 증폭된 500 bp의 PCR 산물

보존 -20℃

용도

- PCR 산물을 평활 말단 (blunt end)의 vector에 cloning

pUC118 Hinc II / BAP

pUC118 Hinc II / BAP는 Hinc III을 이용하여 pUC118 DNA를 절단 후 E. coli C75에서 정제된 alkaline phosphatase (BAP)에 의해 탈인산화한 평활 말단 (blunt end) cloning vector이다.

- Vector map of pUC118

- Cloning site of pUC118

참고자료

- Cloning 실험 입문자를 위한 ‘Step by Step Cloning 가이드’
- 실험 목적별로 추천하는 Cloning Kit

제품설명

내용 (20회용)

보존 -20℃

용도

pUC118 Hinc II / BAP

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참고자료