Cloning ½ÇÇè¿¡¼ °¡Àå Áß¿äÇÑ ´Ü°è Áß Çϳª´Â?
💡DNA¸¦ vector¿¡ ligationÇÏ´Â ´Ü°èÀÔ´Ï´Ù!
•☝☝👉DNA ligationÀº DNA ´ÜÆí°ú ¼±ÇüÈµÈ vector, ±×¸®°í buffer, ATP, DNA ligase°¡ Á¸ÀçÇÏ´Â Á¶°Ç¿¡¼ ¼öÇàµË´Ï´Ù.
´ÙÄ«¶ó DNA Ligation Kit
¡æ °£ÆíÇÑ 1 solution typeÀÇ premix ½Ã¾àÀ¸·Î Á¦°ø
¡æ 16¡É, 30ºÐÀÇ Ç¥ÁØ ÇÁ·ÎÅäÄݻӸ¸ ¾Æ´Ï¶ó, °£´ÜÇÑ plasmid vector ligation½Ã 25¡É, 5ºÐÀÇ °í¼Ó ÇÁ·ÎÅäÄÝ °¡´É
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•☝☝👉¼º°øÀûÀÎ ligation ÁøÇàÀ» À§Çؼ´Â vector¿¡ ´ëÇÑ insert DNAÀÇ »ó´ëÀû ºñÀ²°ú DNA ¸»´ÜÀÇ À¯Çü°ú Ç°Áú, ¿Âµµ, ¹ÝÀÀ ½Ã°£, DNA ³óµµ µî ¼ö¸¹Àº ¿ä¼Ò¸¦ °í·ÁÇØ¾ß ÇÕ´Ï´Ù.
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¡æ ÃÖÀûÈµÈ ¹ÝÀÀ¾× Á¶¼ºÀ¸·Î ´Ù¾çÇÑ DNA ¸»´Ü À¯Çü¿¡µµ »ó°ü¾øÀÌ ³ôÀº È¿À²·Î ligationÀ» ÁøÇà °¡´É
¡æ Sticky end´Â »Ó¸¸ ¾Æ´Ï¶ó, Blunt end ligation, TA cloing¿¡µµ ÃÖÀû!
¡á ´Ù¾çÇÑ Á¦Ç° ¶óÀÎ (4/19±îÁö¸¸ 20%ÇÒÀÎ!)
Ligation |
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ligation
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½Å¼Ó, °£Æí, °íÈ¿À² ligation |
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Blunt end ligation |
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Long insert (>10 kb ligation) |
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TA-cloning
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ÀÌ ¹Û¿¡ ´Ù¾çÇÑ Takara Á¦Ç°µéÀ» 4¿ù 19ÀϱîÁö 20% ÇÒÀΰ¡·Î ±¸ÀÔÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±âȸ¸¦ ³õÄ¡Áö ¸¶¼¼¿ä!
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