Aureobasidin A ³»¼º È¿¸ð ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛ
°³¿ä
Aureobasidin A ³»¼º ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀº Ç×Áø±Õ¼º Ç×»ý¹°Áú Aureobasidin A(AbA)¿Í Aureobasidin A ³»¼ºÀ¯ÀüÀÚ¸¦ ¼±Åà ¸¶Ä¿·Î ÇÏ´Â vector¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ È¿¸ð ¶Ç´Â ÀϺÎÀÇ Aspergillus¼Ó »ç»ó±ÕÀ» À§ÇÑ ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀÌ´Ù. AbA ³»¼º À¯ÀüÀÚ´Â ¿ì¼ºÀ̹ǷΠÇϳª ¶Ç´Â ¸î copyÀÇ plasmid¸¦ °®´Â °Í¸¸À¸·Îµµ ÇüÁúÀüȯü´Â Aureobasidin A ³»¼ºÀÌ µÈ´Ù. ¶Ç ¿µ¾ç ¿ä±¸¼º º¯À̸¦ °®Áö ¾Ê´Â ¾ß»ýÇü È¿¸ð³ª ½Ç¿ëÈ¿¸ð (1¹èü, ´Ù¹èü)¸¦ ¼÷ÁÖ·Î ÇÏ¿´À» ¶§µµ ³ôÀº È¿À²·Î ÇüÁúÀüȯü¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
Ư¡
¡¤ ¿µ¾ç¿ä±¸¼º º¯À̸¦ °®Áö ¾Ê´Â ¾ß»ýÇü È¿¸ð³ª ½Ç¿ëÈ¿¸ð (¼úÈ¿¸ð, »§È¿¸ð µî)µµ³ôÀº È¿À²·Î ÇüÁúÀüȯ ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
¡¤ ¼±Åà ¹èÁö´Â ¿ÏÀü¹èÁö (YPD µî)¿¡ Aureobasidin A¸¦ ÷°¡ÇÏ´Â °Í »ÓÀ¸·Î, ¹øÀâÇÑ ¿µ¾ç¿ä±¸¼º ¾Æ¹Ì³ë»ê ÷°¡°¡ ÇÊ¿äÇÏÁö ¾ÊÀ¸¹Ç·Î, ´ëÀå±ÕÀÇ °æ¿ì ampicillin÷°¡ ¹èÁö¿¡ ÀÇÇÑ ¼±Åðú °°ÀÌ ÇüÁúÀüȯü¸¦ ½ºÅ©¸®´× ÇÑ´Ù. ¡¤ S. cerevisiae (pAUR101, pAUR112, pAUR123, pAUR135) ¶Ç´Â Schizo.pombe (pAUR224) ¶Ç´Â A. nidulans (pAUR316)·ÎÀÇ ÇüÁúÀüȯ È¿À²Àº ¿µ¾ç¿ä±¸¼º ¼±Åà ¸¶Ä¿¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ °æ¿ì¿Í °°Àº Á¤µµÀÌ´Ù (È¿¸ð : lithium acetate¹ýÀ¸·Î 1~5¡¿104 ÇüÁúÀüȯü/§¶ DNA, »ç»ó±Õ: protoplast-PEG¹ýÀ¸·Î 102~103ÇüÁúÀüȯü/§¶ DNA).
[ÁÖÀÇ]
1) º» Á¦Ç°Àº ¿¬±¸¿ë ÀÌ¿ÜÀÇ ¸ñÀû¿¡´Â »ç¿ëÇÒ ¼ö ¾ø½À´Ï´Ù. ƯÈ÷ »ç¶÷À̳ª µ¿¹°ÀÇ ÀÇ·á, ÀÓ»óÁø´Ü¿¡´Â »ç¿ëÇÏÁö ¸¶½Ê½Ã¿À. ¶Ç ½ÄÇ°, ÈÀåÇ°, °¡Á¤¿ëÇ° µîÀ¸·Î »ç¿ëÇÒ ¼ö ¾ø½À´Ï´Ù.
2) º» Á¦Ç°À» ¿¬±¸¸ñÀû ÀÌ¿Ü¿¡ »ç¿ëÇÏ´Â °æ¿ì´Â »çÀü¿¡ ´ç»ç·Î ¹®ÀÇÇÏ¿© ÁֽʽÿÀ.
<Aureobasidin A ³»¼º ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀÇ °³¿ä> |
ÇüÁúÀüȯ ¼÷ÁÖ |
AbA ³»¼º À¯ÀüÀÚ |
´ëÀå±Õ¡¤ È¿¸ð Shuttle º¤ÅÍ |
º¤ÅÍÀÇ Æ¯Â¡ |
Saccharomyces cerevisiae* |
AUR1-C |
pAUR101 |
¿°»öü »ðÀÔÇü vector |
pAUR112 |
plasmid »óÅ·ΠÀÚÀ²º¹Á¦ °¡´ÉÇÑ vector |
pAUR123 |
´Ü¹éÁú ¹ßÇö¿ë plasmid vector |
pAUR135 |
¸¶Ä¿ Á¦°ÅÇü plasmid |
Schizosaccharomyces pombe |
aur 1r |
pAUR224 |
Schizo. pombe¿ë ¹ßÇö vector |
Aspergillus nidulans |
aur Ar |
pAUR316 |
Plasmid »óÅ·ΠÀÚÀ²º¹Á¦ °¡´ÉÇÑ vector |
* Aureobasidin A ³»¼º ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀº S. cerevisiae ÁÖ Àü¹Ý¿¡ »ç¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ÇüÁúÀüȯ °è·Î¼ °³¹ßµÇ¾úÀ¸³ª S. cerevisiae »Ó¸¸ ¾Æ´Ï¶ó ºÐ·ùÇлó S. cerevisiaeÀÇ ±Ù¿¬Á¾À¸·Î »ý°¢µÇ´Â Kluyveromyces marxianus¿Í K. lactis, Candida glabrata µîÀÇ ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀ¸·Îµµ À¯¿ëÇÏ´Ù.
Aureobasidin A ³»¼º È¿¸ð ÇüÁúÀüȯ ½Ã½ºÅÛÀÇ ¿ø¸®
Aureobasidin A´Â Èæ»öÈ¿¸ð Aureobasidium pullulans No. R106 ÁÖ°¡ »ý»êÇÏ´Â Ç×Áø±Õ¼º Ç×»ý¹°ÁúÀÌ´Ù.
S. cerevisiae, Schizo pombe, C. albicans µîÀÇ Candida¼Ó, ÀϺÎÀÇ Aspergillus¼Ó¿¡ ´ëÇÏ¿© °ÇÑ Ç×±ÕÈ°¼ºÀ» °®°í ÀÖ¾î ûÁÖÈ¿¸ð, »§ È¿¸ð µîÀÇ ½Ç¿ë È¿¸ð¿¡µµ Àú³óµµ (0.1~0.4 §¶/§¢)¿¡¼ Ç×±ÕÈ¿°ú¸¦ ³ªÅ¸³½´Ù.
AUR1-C À¯ÀüÀÚ´Â ´ÙÄ«¶ó¹ÙÀÌ¿À°¡ S. cerevisiae·ÎºÎÅÍ ¾òÀº AbA ³»¼º À¯ÀüÀÚ·Î ¾ß»ýÇüÀÇ ´ë¸³ À¯ÀüÀÚ°¡ Aur1 À¯ÀüÀÚ(Á¦ 11¿°»öü YKL004W) ÀÇ 2°÷ÀÇ ¾Æ¹Ì³ë»êÀ» À¯ÀüÀÚ Á¶ÀÛÀ¸·Î ġȯÇÑ º¯ÀÌ À¯ÀüÀÚÀÌ´Ù. ÀÌ º¯À̵µÀÔÀ¸·Î AUR1-CÀ¯ÀüÀÚ´Â AbA¿¡ ´ëÇÏ¿© ƯÀÌÀûÀÎ ³»¼ºÀ» °®´Â´Ù. °°Àº ¹æ¹ýÀ¸·Î aur1r À¯ÀüÀÚ´Â Schizo. pombe·ÎºÎÅÍ, aurAr À¯ÀüÀÚ´Â A. nidulans¿¡¼ °¢°¢ ¾ò¾î³½ AbA ³»¼º À¯ÀüÀÚ ÀÌ´Ù. À̵é AbA ³»¼º À¯ÀüÀÚ´Â ¿ì¼ºÀûÀ¸·Î ÀÛ¿ëÇϱ⠶§¹®¿¡ ¼¼Æ÷ ³»¿¡ 1 copy°¡ Á¸ÀçÇÏ´Â °Í¸¸À¸·Î ³»¼ºÇüÁúÀ» ¹ßÇöÇÏ°í ¶Ç copy ¼ö¿¡ µû¶ó AbA³»¼ºµµ°¡ »ó½ÂÇÑ´Ù. AUR1-C¸¦ ¼±Åà ¸¶Ä¿·Î ÇÔÀ¯ÇÑ plasmid·Î ÇüÁúÀüȯÇÏ´Â °æ¿ì ÇüÁúÀüȯü´Â AbA ³»¼º Ŭ·ÐÀ¸·Î¼ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
¶ÇÇÑ ÃÖ±Ù Nagiec µî¿¡ ÀÇÇÏ¿© Aureobasidin AÀÇ ÀÛ¿ë±âÀÛÀÌ ¹àÇôÁ³´Ù.Aureobasidin A´Â Áø±ÕÀÇ sphingolipid »ýÇÕ¼º°èÀÇ È¿¼ÒÀÎ inositolphosphorylceramide(IPC) synthaseÀÇ ÀúÇØÁ¦À̸ç, aur1 À¯ÀüÀÚ´Â IPC synthase¸¦ ÄÚµåÇÏ´Â °ÍÀ¸·Î ¿©°ÜÁø´Ù.