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[선택가이드] His-tag 융합 단백질 정제

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[선택가이드] His-tag 융합 단백질 정제

단백질을 정제하는데 있어 가장 간단한 방법은 항체를 이용하는 것이지만, 모든 단백질에 대한 항체가 확립되지 않았기 때문에 단백질에 Tag를 부착하는 방법이 많이 사용되고 있다. 많은 연구자들은 단백질을 정제하기 위해 His-tag를 이용하는데, his-tag는 작은 크기로 단백질 기능과 구조에 큰 영향을 미치지 않으며, N- 혹은 C- terminus 어디에 위치하든 native protein, denatured protein을 정제할 수 있기 때문이다.



분류
6xHis tag
6xHN tag
HAT tag
크기
Small tag
6 amino acids
Histidine-rich peptide
12 amino acids
천연 유래 polyhistidine peptide
18 amino acids
위치
C- / N-terminus C- / N-terminus N-terminus
특징
낮은 단백질 기능 간섭
저분자 단백질에 최적
높은 용해도
고분자 단백질에 최적
높은 용해도
안정적인 단백질 발현
고분자 단백질에 최적
* 보다 자세한 정보는 ‘[선택가이드] 다양한 종류의 tag를 이용한 단백질 생산 및 정제’를 참고하세요.



His-tag 융합 단백질을 정제할 때에는 금속 친화성을 이용하며, 주로 nickel 이온과 cobalt 이온을 기반으로 한 resin이 많이 사용된다.
Ni2+은 더 많은 양의 단백질을 얻을 수 있고, Co2+은 더 높은 순도의 단백질을 얻을 수 있다.






Capturem™ Ni Spin column
분류
TALON® resin / His60 Ni resin
원리
Small
Bed volume
Large
5~15 분
정제 시간
60~120 분
간편한 프로토콜
낮은 bed volume으로 고농도 단백질 획득
18종의 다양한 첨가제 적용 가능 (βME, EDTA, DTT 등)
특징
IMAC
(Immobilized Metal Affinity Chromatography)
Gravity/batch column, FPLC 등 다양한 응용
Capturem™ His-tagged
Purification Miniprep Kit
발현여부 확인
제품
높은 순도의
단백질 정제
TALON® Metal Affinity Resin
Capturem™ His-tagged
Purification Maxiprep
/ Large volumn type
편리하게 scale-up
더욱 많은 양의
단백질 정제
His60 Ni Superflow Resin



 
Purity
Yield
Binding capacity
(㎎ protein / ㎖ matrix)
소요시간 (분)
Ease of use
Capturem His-Tagged
Purification Miniprep Kit
****
800 ㎍/mini
spin column
0.3 ~ 1 ㎎/㎖
5 분
*****
His60 Ni resin
****
60 ㎎/㎖ resin
60 ㎎/㎖
60-120 분
***
TALON resin
*****
20 ㎎/㎖ resin
20 ㎎/㎖
60-120 분
***
Magnetic Beads
*****
15 ㎎/㎖ resin
15 ㎎/㎖
60 분
****



분류
Code
제품명
용량
Spin-Column
Capturem™ His-Tagged Purification Miniprep Kit
Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Kit
Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Columns
Capturem™ His-Tagged Purification Large Volume
Capturem™ His-Tagged Purification 96
Capturem™ His-Tagged Purification 24-Well Plate
TALON resin
TALON® Metal Affinity Resin
TALON® Superflow Metal Affinity Resin
HisTALON™ Superflow Cartridges
TALON® CellThru Resin
TALON® spin Columns
HisTALON™ Gravity Columns
HisTALON™ Gravity Columns Purification Kit
HisTALON™ Buffer Set
TALON® Magnetic Beads
TALON® Magnetic Beads Buffer Kit
Ni resin
His60 Ni Superflow Resin
His60 Ni Superflow Cartridges
His60 Ni Superflow Cartridge Purification Kit
His60 Ni Gravity Columns
His60 Ni Gravity Column Purification Kit
His60 Ni Buffer Set
His60 Ni Magnetic Beads
His-tag 검출항체
6×His mAb-HRP Conjugate
6×His Monoclonal Antibody (Albumin Free)
6×HN Polyclonal Antibody
기타
Magnetic Stand