[적용논문] hiPSC 유래의 세포 모델 시스템
hiPSC와 DEF-CS 500 Culture System 적용 논문
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Functional human iPSC-derived alveolar-like cells cultured in a miniaturized 96-Transwell air-liquid interface model |
https://doi.org/10.1038/s41598-021-96565-4
Functional human iPSC-derived alveolar-like cells cultured in a miniaturized 96-Transwell air-liquid interface model
Teresa Bluhmki, Stefanie Traub, Ann-Kathrin Muller, Sarah Bitzer, Eva Schruf, Marie-Therese Bammert, Marcel Leist, Florian Gantner, James P Garnett & Ralf Heilker
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■ Abstract 미리보기
Human induced pluripotent stem cell (hiPSC)에서 분화한 alveolar-like cell은 공급이 한정적이며 donor variability를 갖는 human primary alveolar cell의 한계 없이, 호흡기 질환 모델과 신약 개발 과정을 위한 유망한 도구로 활용될 수 있다. 본 논문에서는 96-Transwell microplate 시스템에서의 hiPSC 유래 alveolar-like cell을 배양하는 air-liquid interface (ALI) 배양법을 소개한다. hiPSC로부터 lung epithelial progenitor cell (LPCs)로 최종 분화된 세포는 monolayer와 같은 형태를 보이며, 기능적으로 성숙한 alveolar type 2 (AT2)와 같은 상피 세포로 유도되었다. 생리학적 ALI 조건에서 배양된 AT2-like cell은 전형적으로 보이는 alveolar surfactant 단백질 발현과 lamellar-body와 같은 구조를 형성하는 등의 특징을 보였다. AT2-like cell 간 형성된 epithelial barrier의 완성도는 custom으로 제작된 96-parallelized transepithelial electric resistance (TEER) 측정 기기을 통해 확인되었다.
In vitro에서 IPF 질병과 유사한 표현형을 나타내기 위해, IPF 환자의 alveolar 조직으로부터 얻은 cytokine과 growth factor를 이용해 기능적 AT2-like cell을 자극하였다. Cytokine은 pro-fibrotic biomarker의 mRNA 레벨과 단백질 레벨 모두에서 분비되도록 자극하였다. 따라서, hiPSC 유래의 세포 모델 시스템은 특정한 IPF의 특징을 잘 재현할 수 있음과 동시에, 신약 개발을 위한 miniaturized medium throughput의 방식을 지원할 수 있다.
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Cellartis® DEF-CS 500 Culture System (Code Y30010)
- All-in-one system의 hPSC (hESC, hiPSC) 배양 배지
: 배양 배지, Additives, Coating Reagent 포함
- Feeder-free, serum-free 배양으로, 동물 유래 성분 혼입 최소화
- Monolayer 배양을 통한 균일한 세포 상태 유지 및 자연 분화 최소화
