TaKaRa
로그인  |   회원가입  |   ID/PW 찾기  
제품명/제품코드
사이트내검색
단일 세포로 부터 총체적인 유전자 발현해석이 가능한 cDNA를 증폭

WT-Ovation One-Direct

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
데이터가 없습니다

  • 단일세포에서 cDNA 증폭 가능
  • 모든 작업이 하루만에 종료
  • 번거로운 total RNA 조제가 불필요
  • 증폭한 cDNA는 Real Time PCR 및 microarray해석에 이용 가능
제품설명
WT-Ovation One-Direct Amplification System은 단일세포로부터 망라적인 유전자 발현 해석이 가능한 증폭 cDNA를 조제하는 Kit이다. 본 제품을 이용함으로써 1개 이상의 세포에서의 추출액 약 10pg의 정제 total RNA로부터 micro array 및 Real Time PCR 해석에 사용 가능한 타겟을 하루 만에 조제 가능하다. 세포 조제액을 직접 이용하도록 설계되어 있어 번거롭고 시간이 많이 걸리는 RNA 정제 작업이 필요없다. 본 제품에 채용된 NuGEN사의 Ribo-SPIA (Single Primer Isothermal Amplification) 기술을 이용함으로써 진정한 단일세포의 연구를 시작할 수 있다.
본 제품으로 증폭된 cDNA는 직접 Real Time PCR 해석에 사용할 수 있으며, Affymetrix사의 GeneChip 3’ expression array 및 Exon ST/Gene ST array해석을 위해 Encore Biotin Module을 사용한 라벨링에 사용할 수 있다. 그리고 Agilent Solution 및 Illumina사의 프로트콜을 이용하면 Agilent사의 Dual-Mode Gene Expression Array 이나 Illumina사의 BeadArray Expression Array에도 이용 가능하다.


그림 1. 10개의 세포에서 유래된 세포 추출액을 이용한 microarray 해석

각 처리를 완료한 THP-1 세포 중 각각 10개의 세포에서 세포 추출액을 조제하고 cDNA를 증폭한 후, microarray 해석을 하였다. Microarray는 Affymetrix GeneChip Human Gene 1.0 ST array을 사용하여 각3회 실험을 진행하고, Principal Components Analysis (PCA) 해석은 Partek Genomics Suite software를 이용하였다. LPS자극 모델계에 보고되어 있는 microarray의 데이터와 일치하였다.
내용
First Strand Primer Mix
First Strand Buffer Mix
First Strand Enzyme Mix
Second Strand Buffer Mix
Second Strand Enzyme Mix
SPIA Primer Mix
SPIA Buffer Mix
SPIA Enzyme Mix
Primer Mix
Buffer Mix
Enzyme Mix
Nuclease-free Water
Direct Lysis Buffer
Agencourt RNAClean Beads
보존 -20℃
First Strand Primer Mix、SPIA Primer Mix:-80℃
Agencourt RNAClean Beads:4℃
그 외*:-20℃
* Direct Lysis Buffer는 융해 후 4℃ 보존
Kit 이외에 필요한 시약
- SPRIPlate 96R또는
Ring Magnet Plate (Beckman Coulter사, #A29164) 또는
SPRIPlate Ring Super Magnet Plate (Beckman Coulter사, #A32782)
- MinElute Spin Columns (Qiagen, Cat. #28204)

WT-Ovation는NuGEN Technologies사의 trade mark 입니다.

Keyword :
-
DNA/RNA 증폭 (NuGEN)
데이터가 없습니다
-