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human iPS 세포 유래 간세포 (Hepatocyte)

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Cellartis
Y10133
Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC12) Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기 new 라이선스 
1 kit
가격문의   136901
Cellartis
Y10134
Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC18) Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기 new 라이선스 
1 kit
가격문의   136901
Cellartis
Y10135
Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC22) Kit
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1 kit
가격문의   136901

제품특징
  • 3주간 장기배양가능
  • 다양한 CYP활성 유지
  • 각종 Hepatocyte metabolism 확인
  • Lot-to-lot variation 최소화
  • 배양에 필요한 구성품을 모두 포함한 All-in-one 제품

Cellartis® Enhanced hiPS-HEP (Y10050, Y10056, Y10058) 제품이 개선되어 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2(Y10133, Y10134, Y10135)로 버전업!


그림 1. 기존의 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP (HEP v1) 제품과 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (HEP v2)제품의 배양기간과 Assay 기간 비교
제품설명
Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2는 기존 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP제품과 비교하여 20일간의 장기배양능력과 다양한 hepatocyte세포 기능을 향상시킨 제품이다.
Y10133, Y10134, Y10135 제품은 각기 다른 세포주에서 유래된 제품으로 서로 다른 genetic background를 가진다. <세포주 정보 바로가기>

본 제품에 포함되어 있는 세포는 CYP (CYP1A, CYP2C9, CYP3A,등) 활성이 20일 동안 안정하므로, in vitro에서 독성 대사, 간독성, metabolism assay에 적합하다. 또한 바이러스 감염과 백신 개발 연구등의 평가에 사용할 수 있으며, 제품의 lot간 편차가 적어 일정하고 재현성 있는 결과를 얻을 수 있다.

Human iPS 세포 유래 간세포(hepatocyte)는 human primary hepatocyte에서 보이는 각종 metabolism활동을 보이며 개발과정에서 세포의 LDL, glycogen저장능력, urea 생성능력 및 albumin 및 AFP 발현을 검증하였다.

Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 kit에는 세포 회복과 배양에 필요한 supplement kit및 hepatocyte 장기배양을 위한 배지가 포함되어 있으며 기본적인 소모품 외에 배양을 위한
추가적인 제품구입이 필요 없는 all-in-one kit이다.
내용
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y10133)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP (from ChipSC12) (1 vial - 12 × 106 viable cells)
         (※ One 96 well plate 또는 multi-well plate 적용 가능)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Thawing and Plating Kit
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Long-Term Maintenance Medium
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC18) Kit (Code Y10134)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP (from ChipSC18) (1 vial - 12 × 106 viable cells)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Thawing and Plating Kit
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Long-Term Maintenance Medium
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC22) Kit (Code Y10135)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP (from ChipSC22) (1 vial - 12 × 106 viable cells)
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Thawing and Plating Kit
       - Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Long-Term Maintenance Medium
운송
- 80 ℃
보관
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP : 액체질소(Liquid nitrogen)
    - 세포는 수령 후 즉시 액체질소에 보관하십시오. 액체질소 저장이 불가능한 경우, 즉시 세포를 녹여 배양하세요.
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Thawing and Plating Kit (Y10132) : -20 ℃
  • Cellartis® Enhanced hiPS-HEP Long-Term Maintenance Medium (Y30052) : -20 ℃


그림 2. Enhanced hiPS-HEP v2와 primary 간세포 CYP효소 mRNA 발현 비교
배양 24시간 후 human primary 간세포와(상대값 1) 배양 20일 후Enhanced hiPS-HEP v2의 CYP mRNA발현을 qPCR로 비교했다. 그 결과 CYP3A4, 3A5, 3A7, 1A2, 2C19의 발현은 Cellartis Enhanced hiPS-HEP v2에서primary간세포와 유사함을 확인했다.


그림 3. 알부민 생성능력
a. hiPS-HEP v2(C18) 배양 12 일째, 인간 간세포는 배양 24 시간 후에 알부민의 발현을 확인했다.
b. hiPS-HEP v2(n=2) 배양 13 일째와 20 일째에 인간 간세포(n =3)는 배양 24 시간 후에 알부민 양을 ELISA로 측정했다. 그 결과 인간 간세포와 동등한 양을 생성함을 확인할 수 있다.


hiPS-HEP v2 (C18)

인간 간세포

그림4. Glycogen 저장능력
hiPS-HEP는 배양 후 12 일째에, 인간 간세포는 24 시간 후 PAS 염색을 실시했다. 세포 내 글리코겐이 저장되는 것 (핑크)을 확인했다.


그림5. Cellartis Enhanced hiPS-HEP v2를 이용한 만성 독성 시험
융해한 hiPS-HEP에 Amiodarone, Aflatoxin, Troglitazone, Chlorpromazine을 처리 후 (배양 4일에서 18일 사이) 배양 2 일째, 7 일째, 14 일째에 세포 증식 분석을 실시했다. 
그 결과 (a) 인간 간세포와 동일한 변화를 보였으며 (b) 농도 의존적인 감수성을 확인할 수 있었다. 이는 이 세포가 장기 만성 독성 시험에 사용될 수 있음을 보여준다.

1) 융해직후


3) 12일 후
2) 4일 후


4) 19일 후
그림6. Enhanced hiPS-HEP v2의 융해 후 19일까지 세포 형태를 확인했다.
참고문헌
1. Annika Asplund et al . 
One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates HomogenousHepatocyte Cultures Displaying Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells . 
Stem Cell Rev. 2016 12 (1) : 90-104.
2. Nidal, G. et al . 
Highly Synchronized Expression of Lineage-Specific Genes during In Vitro Hepatic Differentiation of Human Pluripotent Stem Cell Lines 
Stem Cells International . 2016 10 .1155 / 2016 / 8648356.
3. Ulvestad M et al.
Drug metabolizing enzyme and transporter protein profi les of hepatocytes derived from human embryonic and induced pluripotent stem cells . 
Biochem Pharmacol. 2013 Sep 1; 86 (5) : 691-702.
4. Yildirimman R et al.
Human embryonic stem cell derived hepatocyte-like cells as a tool for in vitro hazard assessment of chemical carcinogenicity. 
Toxicol. Sci. 2011 Dec; 124 (2) : 278-290.
5. Mantel N et al.
Potential markers of attenuation of YF virus after infection of stem cell -derived human hepatocytes with wild-type Asibi or live-attenuated YF17D virus. 
6. Heins et al. Stem Cells 2004; 22 : 367-376. 
United States National Stem Cell Bank; http://www.nationalstemcellbank.org

Keyword : 간세포,HepaRG,HepG2,toxicitytest,독성시험,간독성
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