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Human, mouse ES / iPS 세포용 배지

GS2-M®

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Cellartis
Y40030
GS2-M®
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100 ml
가격문의   Y40030_DS.v1706.pdf

제품설명
GS2-M 배지는 2 종류의 저분자 억제제 (small molecule inhibitor, CHIR99021, PD0325901 = '2i') 존재하에서 마우스 ES 세포주, iPS 세포주를 제작하기 위해 제조된 화학적 성분이 알려진 무혈청(serum free) 배지이다. CHIR99021, PD0325901은 각각 GSK3β 또는 ERK / MEK의 분화 유도 신호를 억제하는 효과를 가지고 있으며, 세포의 생존을 촉진한다. 마우스 partial iPS 세포 나 pre-iPS 세포를 완전한 다능성 iPS 세포로 변환하기 위해 LIF를 첨가하는 것도 가능하다. (참고 문헌 1, 2)
Native한 ground state 마우스 다능성 줄기 세포의 장기간의 유지는 GS2-M 배지에서만 가능하다.
2i 억제제는 최근 생식 계열로 분화 가능한 ES 세포를 얻기 어려웠던 마우스 종에서 유도와, naive한 사람과 가축 iPS 세포를 제작하는 목적으로도 사용할 수 있게 되었다. (참고 문헌 3, 4, 5)

Figure 1. GS2-M 배지에서 높은 Ground state 유지 가능.
mES 세포의 Ground state 다능성 마커인 Rex-1 GFP 발현을 유동 세포 계측 분석
70%이상 GFP 양성 세포 발현확인, GS2-M 배지 내 고효율 Ground state 유지 확인
Nat. Cell Biol. (2011) 13, 838-845.


Figure 2. GS2-M 배지를 이용 chimeric mice 제작 고효율 가능.
GS2-M 배지를 이용하여 mES 세포 1주일 배양 이후 mouse blastocyst 주입 결과 100% black mouse 제작
고효율 확인.
*Dr. Sakimura and Dr.Abe, Brain research insititute, Niigata Univ제공
내용
  • GS2-M media                      100 ml
  • 2i supplement (DMSO 함유) 100 μl
보존
  • GS2-M media : -20 ℃
  • 2i supplement : -80 ℃
(융해 후 4 ℃에 보관하고 2 주일 이내에 사용)
배지 조제 방법
1. 2i supplement 100 μl를 실온에서 해동 (5 분 이내) 빠르게 스핀 다운한다.
2. 2i supplement 전량을 미리 보온한 배지에 첨가하여 완전히 균일하게 될 때까지 혼합한다.
    Reprogramming phase 또는 복제한 마우스의 iPS 세포의 파종에 이용하는 경우에는 LIF(10 ng/ml)를 준비된 GM2-M 2i 배지에 첨가한다. 필터 멸균은 피한다.
본 제품 이외에 필요한 시약
A. mouse ES와 iPS cells
PBS에 0.1% gelatin type A로 코팅(실온에서 15분 이상)한 배양 용기 또는 0.01% poly-L-ornithine hydrobromide(37℃에서 30분 이상)로 코팅 후 PBS로 2회 washing하고
PBS에 10 μg/mL laminin(37℃에서 3시간 이상)으로 순차적으로 코팅한 용기

B. human iPS cells.
자세한 내용은 Wang W, et al. (2011) 문헌을 참고 바랍니다.
Wang W, et al . (2011) Rapid and efficient reprogramming of somatic cells to induced pluripotent stem cells by retinoic acid receptor gamma and liver
receptor homolog. PNAS (USA) . 108(45): 18283-18288.
참고 문헌    
1.   NANOG Amplifies STAT3 Activation and They Synergistically Induce the Naive Pluripotent Program.
     Stuart HT, van Oosten AL, Radzisheuskaya A, Martello G, Miller A, Dietmann S, Nichols J, Silva JC. (2014) Curr Biol. 2014 Jan 22. [Epub ahead of print]

2.   Optimization of culture conditions for maintaining porcine induced pluripotent stem cells.
     Gao Y, Guo Y, Duan A, Cheng D, Zhang S, Wang H. (2014) DNA Cell Biol. 2014 Jan; 33(1):1-11

3.   Bidirectional developmental potential in reprogrammed cells with acquired pluripotency.
     Haruko Obokata, Yoshiki Sasai, Hitoshi Niwa, Mitsutaka Kadota, Munazah Andrabi, Nozomu Takata, Mikiko Tokoro, Yukari Terashita, Shigenobu Yonemura, Charles A. Vacanti &
     Teruhiko Wakayama. (2014) Nature 2014 505, 676-680

4.   Stimulus-triggered fate conversion of somatic cells into pluripotency.
     Haruko Obokata, Teruhiko Wakayama, Yoshiki Sasai, Koji Kojima, Martin P. Vacanti, Hitoshi Niwa, Masayuki Yamato & Charles A. Vacanti. (2014) Nature 2014 505: 641-647

5.   Efficient reprogramming of naive-like induced pluripotent stem cells from porcine adipose-derived stem cells with a feeder-independent and serum-free system.
     Zhang Y, Wei C, Zhang P, Li X, Liu T, Pu Y, Li Y, Cao Z, Cao H, Liu Y, Zhang X, Zhang Y. (2014) PLoS One. 2014 Jan 20;9(1):e85089

6.   Beta-catenin is vital for the integrity of mouse embryonic stem cells.
     Raggioli A, Junghans D, Rudloff S, Kemler R. (2014) PLoS One. 2014 Jan 21;9(1):e86691

7.    Identification of a Novel Gene Signature of ES Cells Self-Renewal Fluctuation through System-Wide Analysis.
      Cerulo L, Tagliaferri D, Marotta P, Zoppoli P, Russo F, Mazio C, Defelice M, Ceccarelli M, Falco G. (2014) PLoS One. 2014 Jan 2;9(1):e83235

8.   The impact of culture on epigenetic properties of pluripotent stem cells and pre-implantation embryos.
     McEwen KR, Leitch HG, Amouroux R, Hajkova P. (2013) Biochem Soc Trans. 2013 Jun; 41(3):711-9

9.   Inhibition of MAP2K and GSK3 signaling promotes bovine blastocyst development and epiblast-associated expression of pluripotency factors.
     Harris D, Huang B, Oback B. (2013) Biol Reprod. 2013 Mar 28;88(3):74

10.  Totipotent embryonic stem cells arise in ground-state culture conditions.
     Morgani SM, Canham MA, Nichols J, Sharov AA, Migueles RP, Ko MS, Brickman JM. (2013) Cell Rep. 2013 Jun 27;3(6):1945-57

Keyword : Cellartis,EScell,iPS배지,줄기세포배지
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