어떤 방법보다 쉽고 빠르다! 가장 정확한 cloning 방법 추천,
In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 20% 할인 기회!
기간: 2024년 5월 2일 (목) ~ 6월 28일 (금)
■ In-Fusion® 기술 소개
3’ → 5’ exonuclease 활성을 가지는 In-Fusion® 효소를 이용해 DNA 단편 간의 상동서열 (약 15 bp)를 융합시켜 cloning하는 기술로, 제한효소/ligase 없이도 쉽고 정확하게 seamless한 산물을 얻을 수 있다.
■ In-Fusion® 타사대비 장점
→ In-Fusion® Snap Assembly와 Gibson assembly 비교
| In-Fusion® Snap Assembly | Gibson assembly-based cloning |
Colony 수 | 일반적인 cloning부터 *복잡한 cloning까지 타 방식에 비해 colony가 많이 형성됨 | *복잡한 cloning의 경우 colony가 적게 형성되거나, 형성되지 않음 |
Nick 수복 과정 | DNA polymerase를 사용하지 않고, comp. cell에서 nick을 수복하여, error가 거의 없음 | DNA polymerase사용으로 nick 수복 중 error가 발생될 수 있음 |
Ligase를 사용하지 않아, self-ligation 등의 백그라운드가 거의 없음 | in vitro ligation을 이용하므로, self-ligation의 확률이 높음 | |
반응 시간 | 15분 | ~60분 |
A-overhang insert 교정 | 3’ → 5’ exonuclease 활성: PCR 과정에서 임의로 부가된 A 1염기의 교정 가능 | 5’ → 3’ exonuclease 활성: PCR 과정에서 임의로 부가된 A 1염기의 교정 불가능 (정확도가 떨어짐) |
PCR primer 디자인 | 15 bp overlap으로, PCR 조건 설정 시 유리 | 일반적으로 20 ~ 30 bp overlap |
*복잡한 cloning: multiple cloning, large insert/vector 등
→ In-Fusion® Snap Assembly와 NEBuilder HiFi 비교 데이터
그림1. Insert 크기에 관계없이 NEBuilder HiFi보다 In-Fusion® Snap Assembly에서 훨씬 많은 colony 수를 보였고, 95% 이상으로 높은 정확도를 보였다.
그림2. 제한효소로 선형화한 vector에 single insert를 cloning한 결과, 말단의 형태 (overhangs, blunt)에 관계없이 NEBuilder HiFi보다 In-Fusion® Snap Assembly에서 훨씬 많은 colony 수를 보였다.
■ In-Fusion® 제품 라인
Code | 제품명 | 적용 |
638947 | ▪ 원하는 대로 빠르고 간단하게 In-Fusion® Cloning | |
638954 | ▪ 동결건조 형태로 실온보관이 가능 ▪ 빠르고 간단하게 In-Fusion® Cloning | |
638951 | ▪ 최적화된 comp. cell이 포함된 버전의 In-Fusion® Cloning | |
636763 | ▪ 높은 형질전환 효율을 가진 E. coli competent cell |
관련 문의사항은 다카라코리아 지역 대리점 (대리점 안내) 또는 고객지원 (02-2081-2510)으로 문의 바랍니다.
감사합니다.
