Selection guide for bacterial expression system |
|
장점 |
배양 볼륨당
단백질 수율 |
적용 |
Low-temperature expression system |
pCold DNA cold shock
expression system
|
- 목적 단백질의 발현 수율 및 순도를 높이는 저온 발현 시스템
- 저온에서 목적 단백질의 발현만 유도하고 그 외에 E. coli 숙주 단백질의 발현 및 protease 활성을 억제
- Chaperone plasmid를 함께 사용하면 목적 단백질의 가용성을 높여, 회수율을 개선할 수 있음
|
10 ㎎
~ 90 ㎎/L
|
- 불용성 단백질의 발현
- 다양한 종류의 His-tagged protein expression vector 라인업
|
High-yield expression systems |
B. subtilis Secretory Protein Expression System
|
- 목적단백질을 숙주 바깥으로 분비 발현시키는 시스템 (Secretion)으로 단백질 대량 생산에 적합
- 173종류의 B. subtilis 유래 secretory signal peptide를 In-Fusion Cloning 시스템으로 편리 하게 cloning하여 적용 가능
|
25 g/L 이상
|
- 목적 단백질의 대량 분비 (secretion) 배양
(Large scale fermentation 등)
|
Brevibacillus Expression System
|
- 분비형 또는 세포내 단백질을 Active protein 형태로 발현 가능
- 숙주 내 Endotoxin과 protease 발현 수준을 낮춰, 타 시스템 대비 더 높은 순도의 단백질을 대량발현 가능
|
4 g/L 이상
|
- 독성 단백질 또는 Disulfide bond를 가지는 단백질 등의 발현에 최적
- 다양한 종류의 His-tagged protein expression vector 라인업
|
High-purity expression system |
SPP System (single-protein production system)
|
- E. coli 숙주 유래의 단백질 발현은 억제하고 목적 단백질만 효율적으로 발현시키는 mRNA interferase 를 사용한 시스템
- 목적 단백질을 높은 순도로 발현시킬 수 있고, 특히 효율적으로 방사성 동위원소 라벨링 가능; 최대 90%까지 라벨링 확인
|
~ 90 ㎎/L
|
- 고순도의 단백질 발현
- 목적 단백질의 방사선 동위원소 라벨링에 최적
|
Standard E. coli expression systems |
pET Express & Purify Kits
|
- N- / C-말단 6x HN tagged protein expression vector (pET 기반)
- Expression system과 purification kit 모두 포함
- Cloning: 전통적인 Ligase 법
/ 신개념 In-Fusion cloning
- TALON 과 His60 Ni 기반의 resin 또는 resin with buffer 제품
|
1 g/L 이상
|
- His-tagged protein의 발현 및 정제
|
HAT Protein Expression
& Purification System |
- 목적 단백질의 가용성 증대
- 제품 내 TALON resin, column, buffer가 포함
- 중성 pH에서 native 또는 denature 상태의 단백질 정제 모두 가능
|
1 g/L 이상
|
- HAT-tagged protein의 발현 및 정제
|
