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In-Fusion® HD Cloning Plus

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
638909
In-Fusion® HD Cloning Plus
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
10 회
411,000원  제조사 페이지로 바로가기 117231
Clontech
638910
In-Fusion® HD Cloning Plus
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50 회
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Clontech
638911
In-Fusion® HD Cloning Plus
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Clontech
638920
In-Fusion® HD Cloning Plus
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96 회
2,589,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
638916
In-Fusion® HD Cloning Plus CE
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10 회
423,000원  제조사 페이지로 바로가기 17497
Clontech
638917
In-Fusion® HD Cloning Plus CE
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50 회
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Clontech
638918
In-Fusion® HD Cloning Plus CE
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100 회
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Clontech
638919
In-Fusion® HD Cloning Plus CE
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
96 회
2,659,000원  제조사 페이지로 바로가기

※ In-Fusion Cloning 생생 후기보기

Product Name

Cat. No.

Size

Purification Kit Included

Stellar Competent Cells Included

CloneAmp HiFi PCR Premix Included

In-Fusion HD Cloning Plus

638909

10 rxns

Spin Columns

Yes

Yes

638910

50 rxns

Spin Columns

Yes

Yes

638911

100 rxns

Spin Columns

Yes

Yes

638920

96 rxns

Spin Columns

Yes

Yes

In-Fusion HD Cloning Plus CE

638916

10 rxns

Cloning Enhancer

Yes

Yes

638917

50 rxns

Cloning Enhancer

Yes

Yes

638918

100 rxns

Cloning Enhancer

Yes

Yes

638919

96rxns

Cloning Enhancer

Yes

Yes


Cloning Kit-PCR Based Seamless DNA Cloning with In-Fusion HD Cloning Plus
In-Fusion Cloning은 어떤 PCR 단편이나 복수의 DNA 단편도 선형화된 vector(linearized vector)에 15분(In-Fusion HD EcoDry는 30분)의 반응으로 directional cloning이 가능하다 (Figure 1). 또한 PCR 단편은 제한효소처리나 phosphorylation과 같은 추가적은 처리 단계가 필요하지 않다. In-Fusion 효소는 선형화된 vector 말단과 PCR로 증폭된 PCR 단편(insert)의 말단의 15bp homologue sequence를 인식하여 융합시킨다. 이 15 bp의 융합서열은 원하는 sequence를 증폭하고자 하는 PCR primer에 디자인하여 껴 넣으면 쉽게 만들 수 있다.

이 실험방법을 사용하면 아래와 같은 다양한 실험에 적용 가능하다.
  • Subcloning 없이도 복수의 DNA 단편을 원하는 vector에 Cloning
  • 내부의 특정 부분만 교체하는 Modular expression vector 제작
  • 불필요한 염기가 없는 Fusion protein 구축
  • DNA 단편의 제거나 교체
  • Insert의 point mutation이나 제한효소 사이트 첨가
  • 유전자내 형광 단백질의 tag 교체
  • cDNA로 UTRs첨가



Figure 1. The In-Fusion cloning protocol.



Figure 2. The In-Fusion HD Cloning System has been optimized for cloning large fragments. Ten out of ten colonies contain the correct insert (100% efficiency) when cloning fragments as large as 15 kb (results confirmed by colony PCR screening).



Figure 3. The In-Fusion HD Cloning System has an improved capability for cloning multiple fragments in a single reaction. Using this system, cloning up to four 1-kb fragments simultaneously is as easy as cloning a single fragment. This saves weeks that would otherwise be spent screening clones and subcloning.

In-Fusion HD Cloning Plus Components
All In-Fusion HD Cloning Plus kits contain the In-Fusion HD enzyme premix and reagents for control experiments. In-Fusion HD Cloning Plus kits also include:
  • CloneAmp HiFi High Fidelity PCR Premix
    CloneAmp HiFi PCR Premix is a convenient 2X master mix that provides exceptionally accurate, efficient and fast DNA amplification. The premix contains dNTPs and an optimized buffer, allows rapid set-up of PCR reactions, and facilitates successful cloning.
  • Stellar Competent Cells
    An E. coli HST08 strain is included that provides high transformation efficiency (greater than 5 x 108 cfu/μg) and compliments the efficiency of the In-Fusion HD Cloning Plus kit.
  • Cloning Enhancer or NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up
        o Cloning Enhancer (CE) is an easy-to-use enzyme premix that removes background plasmid DNA and PCR residue, eliminating
          the need for PCR insert purification prior to cloning. In-Fusion HD Cloning Plus CE kits are ideal for cloning when there is a single
          PCR product on the gel.
        o Alternatively, NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up is suitable for gel extraction as well as PCR purification.

Keyword : infusion, In-fusion, 인퓨젼, 인퓨전, in fusion
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