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Home > 전제품보기 > 세포 · 배지 > Bioassay 시약 > TRACP & ALP double-stain Kit
Tartrate-resistant acid phosphatase 및 Alkaline Phosphatase 2 중 염색 Kit

TRACP & ALP double-stain Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
MK300
TRACP & ALP double-stain Kit
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120 wells
(5 x 24 well plates)
455,000원  MK300_e.v1509.pdf

  • TRACP (TRAP)와 ALP를 각각 또는 동시에 염색 가능
  • Premix 형태의 시약으로 간편한 사용
  • Fixation solution과 Nuclear stain 시약 기본 포함
  • 세포, Paraffin, Frozen section에 염색 가능
제품설명
본 제품은 Bone-metabolism (골대사)에 관련된 세포를 염색하는 제품이다. Bone metabolism은 조골세포에 의한 골형성과 파골세포에 의한 골흡수의 상호 작용으로 진행된다. 2개의 enzyme marker를 동시에 검출하여, 골 관련 세포의 분화나 골조직의 분포를 관찰 할 수 있다.
본 제품은 조골세포 (Osteoblasts)의 enzyme marker인 Alkaline phosphatase (ALP)와 파골세포 (Osteoclasts)의 enzyme marker인 Tartrate-resistant acid phosphatase (TRACP, TRAP)를 염색하기 위한 chromogenic substrates 및 핵 염색 시약을 포함하고 있다. TRACP & ALP double-stain Kit는 24 well plate 또는 slide glass에 배양된 세포의 Acid 및 Alkaline phosphatase 활성을 각각 또는 동시에 염색하여 비교할 수 있다. 또한, 시약은 premix 형태로 제공되어 간편하게 사용 가능하다.
결과

그림 1. 16주 JW토끼 (수컷)로부터 채취한 골수 세포에 M-CSF 및 활성형 비타민 D3 처리하여 6일간 배양 후 TRACP의 염색을 실시하였다.


그림 2. 생후 24일의 SD rat (암컷)으로부터 채취한 골수세포에 M-CSF와 활성형 비타민 D3를 첨가하여 10일간 배양 후 ALP 염색을 실시하였다.


그림 3. Human Bone Marrow Mononuclear cells에 여러 가지 첨가인자를 인자를 첨가하여 배양 후, 분화가 되었을 때 (9일) TRACP 및 ALP의 염색을 각각 실시하였다.
염색원리
1) Acid phosphatase 염색의 원리
Naphthol-AS-BI-phosphate
    ↓Acid phosphatase
HPO42-+ naphthol-AS
    ↓Fast Red Violet LB(Sodium azide)
Azo dye(적자색)(pH5.2)

2) Alkaline phosphatase 염색의 원리
Bromo-Chloro-Indolyl phosphate
    ↓Alkaline phosphatase
HPO42-+ Br-Cl-Indol
    ↓Nitro Blue Tetrazolium Chloride
Formazan dye(청자색)(pH9.5)
내용

1. Fixation solution

30 ㎖

2. Sodium tartrate

4 ㎖

3. Substrate for ACP (premixed) (NABP/ FRVLB)

10 ㎖용×3 ea

4. Substrate for ALP (premixed) (BCIP/ NBT)

10 ㎖용×3 ea

5. Nuclear stain Methyl green

10 ㎖

보존 : -20℃ (사용 후, 각 시약에 적절한 온도에 보관 할 것)

Keyword : TRAP, Bone metabolism, Osteoblast, Osteoclast
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