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cDNA Library 구축 All-in-One Kit

cDNA Library Construction Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
6136
cDNA Library Construction Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기
5 회
796,000원  6136_Korea.pdf

내용 (5회)
1. Reverse Transcriptase (M-MLV) (200 U/㎕) 5 ㎕
2. RNase Inhibitor (20 U/㎕) 5 ㎕
3. Oligo (dT)18 Anchor Primer (1 ㎍/㎕) 10 ㎕
4. 5×1st Strand Synthesis Buffer 40 ㎕
5. 1st Strand dNTP Mixture 6 ㎕
6. E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 10 ㎕
7. E. coli DNA Polymerase I (20 U/㎕) 10 ㎕
8. 2nd Strand dNTP Mixture 23 ㎕
9. 5×2nd Strand Synthesis Buffer 150 ㎕
10. T4 DNA Polymerase (1 U/㎕) 20 ㎕
11. 10×T4 DNA Ligase Buffer 20 ㎕
12. T4 DNA Ligase (350 U/㎕) 20 ㎕
13. EcoR I-Sma I Adaptor (0.4 ㎍/㎕) 18 ㎕
14. Not I Supplement 135 ㎕
15. Not I (50 U/㎕) 15 ㎕
16. tRNA (10 ㎍/㎕) 5 ㎕
17. Dr. GenTLE Precipitation Carrier 60 ㎕
18. 3 M Sodium Acetate (pH5.2) 1 ㎖
19. pAP3neo Predigested Vector (100 ng/㎕)*1 5 ㎕
20. RNase-free H2O 640 ㎕
21. Control RNA (1 ㎍/㎕) 5 ㎕
22. T7 promotor primer*2 (5 pmol/㎕) 20 ㎕
23. T3 promotor primer (for pAP3neo)*6 (5 pmol/㎕) 20 ㎕
24. Spin column 5 ea
*1 EcoR I, Not I으로 절단된 상태이다.
*2 Insert 체크 및 Sequencing에 사용가능
보존
Dr. GenTLE Precipitation Carrier, 3 M Sodium Acetate (pH5. 2), 스핀 컬럼: 4℃
그 외 Kit내 시약류: - 20℃
제품설명
진핵생물의 여러 조직이나 세포에서 조제한 poly(A)+ RNA로부터 cDNA를 합성하여 클로닝하는 기술은 분자생물학적 연구에 있어서 중요한 방법의 하나로 유전자의 구조해석이나 목적 단백질의 발현 조작에 활발하게 적용되고 있다.
일반적으로 cDNA 합성과 library는 목적 poly(A)+ RNA에 상보적인 double strand cDNA를 합성해 박테리아나 바이러스 유래의 vector에 클로닝하여 이 cDNA 재조합체를 박테리아 혹은 진핵세포에 도입하여 복제한 후 cDNA를 증폭시켜, cDNA의 해석을 실시하거나 in vitro transcription 또는 in vitro translation 등에 이용된다.
본 제품은 주로 동식물 유래의 poly(A)+ RNA로부터 double strand cDNA를 합성한 후, 첨부된 pAP3neo 등의 plasmid vector에 재조합하여 cDNA library를 구축하기 위한 Kit이다. cDNA library의 구축에는 Gubler-Hoffman 방법에 근거한 linker-primer 법을 사용하고 있어, 유전자의 방향성을 유지하는directional cloning이 가능하다.
사용상의 주의
본 제품에는 형질전환에 필요한 대장균은 포함되어 있지 않다. 메틸화 DNA에 의한 형질전환(electroporation법)이 가능한 대장균, E. coli HST02 Electro-Cells (Code 9026), Clontech의 Supercharge EZ10 Electrocompetent Cells(Code 636756) 등을 별도로 준비해야 한다.

Keyword :
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