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TITANIUM One-Step RT-PCR Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
639503
TITANIUM One-Step RT-PCR Kit
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30 rxn
420,000원  제조사 페이지로 바로가기 PT3397-2.pdf, PT3397-1.pdf
Clontech
639504
TITANIUM One-Step RT-PCR Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
100 rxn
972,000원  제조사 페이지로 바로가기

- 10 pg만의 total RNA로도 높은 감도 및 증폭 효율을 실현
- TaqStart antibody에 의한 hot start PCR로 특이성 향상
- cross contamination을 방지
- 유전자 발현 level의 비교가 간편하며 단시간에 가능

TITANIUM One-step RT-PCR Kit은 사용하기 쉬운 조작에 의한 최신 RT-PCR Kit이다. 모든 반응을 1개의 tube에서 수행되기 때문에, cross contamination 문제가 발생하지 않는다. 본 Kit은 간편할 뿐만 아니라 상당히 high-sensitivity와 높은 증폭 효율을 갖고 있다. One-step RT-PCR법은 다른 시료에서의 유전자 발현 level 비교에 이상적이다. 또한 본 Kit은 상당히 high-sensitivity이므로 RT-PCR을 분석 목적에 사용할 때에도 높은 신뢰성을 얻을 수 있다.
향상된 One-step법
기존 방법에서는 reverse transcription 반응과 PCR 반응을 별도의 단계로 실시하기 때문에 각 실험 단계에 시간이 필요하고 시료의 crossover나 contamination의 가능성도 있었다. 반면 TITANIUM One-step RT-PCR는 RT 반응에서부터 PCR cycling까지 tube의 개폐나 별도의 시약 첨가를 하지 않고 한번에 진행할 수 있다. 고성능의 TITANIUM One-step RT-PCR Kit은 다음과 같은 특징을 가지고 있다.
  • Hot start PCR에 의한 특이성과 감도 향상
    TITANIUM RT Taq enzyme mix에는 hot start PCR용 TaqStart antibody가 포함되어 있다(1~3).
  • RNA 2차 구조 발생에 의한 문제 최소
    열 안정성이 높은 시약에 의해 reverse transcription 반응을 50 ℃에서 실시할 수 있다.
    유전자 특이적 primer를 이 온도에서 사용하면 역전사 반응의 특이성이 향상된다.
복수의 RNA 시료로 실험 할 경우, One-step RT-PCR법은 가장 적합한 방법이다. 단, 단일 RNA를 source로 하여 복수의 fragment를 증폭할 경우는 reverse transcription 반응액이 1종류이면 되므로 2step RT-PCR 방법이 실제로는 효율적일 수 있다. 2step법의 실험에는 PowerScript reverse transcriptase 또는 Advantage RT-for-PCR Kit을 사용할 것을 권장한다.

그림1. TITANIUM One-Step RT-PCR가 뛰어난 고감도
mouse liver에 유래하는 다른 양의 total RNA를 TITANIUM One-Step RT-PCR의 주형으로서 사용해,β-actin의 전사 산물을 증폭했습니다. 목적 transcript는 50℃으로 1시간동안 역전사 반응을 수행하고 40 cycle의 PCR로 증폭했다. RT-PCR 산물은 EtBr/agarose gel 전기 영동했다. Lane 1:1μg의 total RNA, Lane 2:100ng, Lane 3:10ng, Lane 4:1ng, Lane 5:100pg, Lane 6:10pg, Lane 7:1 pg, Lane 8:template 없음, Lane M:DNA size marker

그림 2. 현재 시판되고 있는 One-step kit보다 높은 효율의 TITANIUM One-Step RT-PCR
TITANIUM One-Step RT-PCR Kit와 2개 타사 One-step kit를 이용하여 반응을 수행하였다. 각사가 추천하는 조건에서 동일한 반응시켰습니다. RT-PCR 산물은 EtBr/agarose gel 전기 영동에의해 해석했습니다. 각 반응 모두 human placenta total RNA(1μg)를 주형으로서, 9 종류의 human transcript를 증폭했다. Lane M: DNA size marker
구성물
TITANIUM RT Taq Enzyme Mix
One-Step Buffer
dNTP Mix
Thermostabilizing Reagent
GC-Melt
Oligo(dT) Primer
Recombinant RNase Inhibitor
Control Mouse β-Actin Primers
Control Mouse Liver Total RNA
RNase-Free H2O
User Manual (PT3397-1)
Protocol-at-a-Glance (PT3397-2)
보존
-70℃:Control Mouse Liver Total RNA
-20℃:그외 모든 시약
적용분야
상세정보
639503

639504


Keyword :
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Reverse Transcription (Clontech)
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