닫기
TaKaRa
로그인  |   회원가입  |   ID/PW 찾기  
제품명/제품코드
키워드검색
검색
Home > 전제품보기 > PCR > RT-PCR 관련 제품 > mRNA Selective PCR Kit Ver.1.1
RNA 유래의 cDNA만을 증폭할 수 있다!

mRNA Selective PCR Kit Ver.1.1

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
데이터가 없습니다

제품설명
RT-PCR을 실시할 경우 시료 RNA의 순도는 실험의 성공 여부를 좌우하는 중요한 요인의 하나이다. 일반적으로 RNA의 정제법은 AGPC법을 이용하고 있는데 이 방법으로는 genomic DNA를 완전히 제거하기 어렵다. 시료에 genomic DNA가 혼입되면 목적 cDNA와 함께 genomic DNA나 목적하지 않는 유전자가 증폭되는 원인이 된다. 이 문제를 해결하기 위하여 시료 RNA로부터 mRNA를 정제하거나 DNase를 처리하는데, 이 조작은 번잡하고 RNA에 손상을 줄 염려가 있다.
본 제품은 cDNA 합성 시에 dNTP analog를 삽입 (incorporation)함으로써 cDNA와 genomic DNA를 구별하고 또한, mRNA Selective PCR Buffer를 채용하여 85℃ 전후의 낮은 변성 온도하에서 RNA 유래의 cDNA만을 증폭하는Kit이다.
필요한 시약을 한 개의 tube에 조제하여 시약을 첨가하지 않고 AMV (Avian Myeloblastosis Virus) 유래의 역전사효소로 RNA에서 cDNA를 합성하고, LA PCR technology를 응용한 AMV-optimized Taq으로 cDNA를 연속적으로 증폭할 수 있다. 또, Oligo dT Primer나 Random 9 mers를 사용하는 2 step 법도 가능하다.
원리
mRNA Selective PCR Kit은 dNTP analog의 존재 하에서 RT 반응을 실시하여 값이 낮은 cDNA를 합성한다. 그 후 PCR 반응을 낮은 변성온도 (85℃)에서 실시하므로써 값이 낮은 cDNA만이 증폭된다. genomic DNA는 낮은 변성온도에서는 해리되지 않으므로 증폭되지 않는다 (그림 참조).
특징
RNA template 전반적
증폭 사이즈 최소한 2kb까지 가능
역전사효소 AMV Reverse Transcriptase
(42℃~50℃에서 역전사 가능)
DNA Polymerase AMV-optimized Taq
RNase Inhibitor 필요 (Kit에 포함)
조작 한 개의 tibe 안에서 연속적으로 RT-PCR반응
(1 step 법) 또는 2 step
주의
본 Kit에 의해 증폭된 산물은 일부 제한효소로 절단되지 않는 경우가 있다.
본 Kit에 의한 1 step 법으로 RT-PCR 반응을 실시할 때는 특이적인 Primer를 사용한다. 1 step 법에서는 통상 Random Primer나 Oligo dT Primer를 사용할 수 없으나 2 step 의 경우에는 Random Primer 또는 Oligo dT Primer에 의한 역전사 반응이 가능하다. 본 Kit는 1 step RT-PCR 반응 (표준 protocol) 50 회용이나, 2 step RT-PCR 반응을 시행하는 경우에는 2×mRNA selective PCR buffer Ⅰ 또는 Ⅱ, MgCl2, dNTP/analog mixture의 용량 부족에 의해 27회 반응분으로 된다.
내용 (50 회)
AMV Reverse Transcriptase XL*1 (5 U/㎕) 50 ㎕
RNase Inhibitor (40 U/㎕) 50 ㎕
AMV-Optimized Taq (5 U/㎕) 50 ㎕
2×mRNA Selective PCR Buffer I*2 1.25 ㎖×2
2×mRNA Selective PCR Buffer II*2 1.25 ㎖×2
dNTP/analog Mixture*3 250 ㎕
MgCl2 (25 mM) 500 ㎕
Control F-1 Primer (20 μM) 10 ㎕
Control R-1 Primer (20 μM) 10 ㎕
Control Template*4 10 ㎕
RNase Free dH2O 1 ml
Random 9 mers (50 μM) 50 ㎕
Oligo dT Primer (50 μM) 50 ㎕
보존 -20℃
관련제품
- Reverse Transcriptase XL (AMV) for RT-PCR
(TaKaRa Code 2630A)
- Ribonuclease Inhibitor
(TaKaRa Code 2311A)

Keyword :
-
RT-PCR 관련 제품
> RT-PCR kit, 꼼꼼히 따져보고 선택하기
역전사 반응의 최적 온도가 높은 RT-PCR 용 Kit
> BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver. 1.1
RNA 유래의 cDNA만을 증폭할 수 있다!
> mRNA Selective PCR Kit Ver.1.1
PrimeScript RTase와 PrimeSTAR Max를 조합하여 최..
> PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
Components를 Premix화 하여 조작성이 향상된
> PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
색소 첨가로 반응 후 그대로 전기영동 가능
> PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
PrimeScript RTase & TaKaRa Ex Taq HS로 최적화된..
> PrimeScript™ RT-PCR Kit
SMART법을 이용한 new version 5’-/3’-RACE Kit
> SMARTer® RACE 5'/3' Kit
PCR까지 1 tube로 가능한 1 step RT-PCR 용 Kit
> TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)
Long strand cDNA 증폭에
> TaKaRa RNA LA PCR™ Kit (AMV) Ver.1.1
TaKaRa Ex Taq HS과 AMV RTase를 이용한 2 step RT-..
> TaKaRa RNA PCR™ Kit (AMV) Ver.3.0
-