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Home > 전제품보기 > Stem Cell > Cardiomyocyte > 초고순도 Cardiomyocyte from human iPSC
hiPS cell 유래의 심근세포

초고순도 Cardiomyocyte from human iPSC

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Cellartis
 Y50025
 MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12) Kit
관련학술 구매하기 라이선스  		1 Kit
 가격문의   주문 제작 Y50025_e.v2008.pdf
Cellartis
 Y50023
 MiraCell® CM Culture Medium v2
관련학술 구매하기 		100 ml
 가격문의  
Cellartis
 Y50015
 MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12) Kit
관련학술 구매하기 라이선스  		1 Kit
 가격문의   주문 제작 Y50015_e.v2008.pdf
Cellartis
 Y50013
 MiraCell® CM Culture Medium
관련학술 구매하기 		100 ml
 가격문의  


* MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y50025)와 MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12) Kit (Code Y50015)는 주문 후 제작되는 제품이니, 일정에 참고 바랍니다.
* MED probe를 이용한 심장 독성 평가 프로토콜 (1) 해동 후 MED probe로 세포를 옮길 때
* MED probe를 이용한 심장 독성 평가 프로토콜 (2) MED probe 내 바로 해동할 때
제품설명
  • 심근 세포의 순도 95%이상 (cTnT양성률)
  • 항생제를 사용한 정제 과정 없이 고순도 분화
  • 자율 박동 능력 보유
  • 각종 이온 통로 유전자를 발현 (SCN5A, KCNQ1, CACNA1C, KCNH2등)
  • 각종 이온 통로 차단제(E-4031, Chromanol 293B, Verapamil, Mexiletine)에 대한 전기 생리학적 반응성

MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12)는 인간 iPS세포에서 분화된 고순도 심근세포이며 심근 세포의 특징과 기능 해석 등에 사용 가능하다. 또한 심근세포의 생리학 적인 기능의 해석과 MEA (Multi-electrode array) 시스템 등을 이용한 다양한 약제에 의한 심장 독성 시험 등에 대해서도 폭넓게 사용할 수 있다.
본 제품은 교토 대학 iPS세포 연구소에서 개발된 인간 심근 세포의 제작 기술을 Takara Bio가 iHeart Japan㈜으로부터 도입하여 공동 개발한 제품이다. 본 심근세포 제작 기술은 심근 특이적 프로모터 (α-MHC등)를 이용한 항생제(예: puromycine 등) 선별 과정 없이 고순도로 심근 세포로 분화가 가능하고, 장기간의 배양 시 일반적으로 발생하는 순도의 저하가 90일간 배양 후에도 관찰되지 않았다 (논문 투고 중).
본 제품의 제조에 사용된 human iPS cell line ChiPSC12 (Code Y00285)은 feeder-free 배양 조건인 Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System (Code Y30010)으로 배양되었다.

본 제품에는 세포와 인간 ES/iPS세포 유래 심근 세포 융해용 배지 (MiraCell® CM Thawing Medium), 심근 세포 배양용 배지 (MiraCell® CM Culture Medium v2)가 포함되어있다.
※ MiraCell® Cardiomyocyte v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y50025)는 기존 제품 (MiraCell® Cardiomyocyte (from ChiPSC12) Kit (Code Y50015)의 기본적인 특징 (순도, viability, 부착효율, E-4031 반응성 등)을 유지하고 있어, 심장독성 평가에 사용할 수 있다. 또한, MiraCell® Cardiomyocyte v2 (from ChiPSC12) Kit는 FPD (Filed potential duration, by Fridericia) 분석이 가능하도록 심장 박동수가 증가되었다.
내용

MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y50025)

MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12)

1 vial

＞3 x 106 cells

MiraCell® CM Thawing Medium

1 bottle

20 ml

MiraCell® CM Culture Medium v2 (Code Y50023)

1 bottle

100 ml

MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12) Kit (Code Y50015)

MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12)

1 tube

＞3 x 106 cells

MiraCell® CM Thawing Medium

1 bottle

20 ml

MiraCell® CM Culture Medium (Code Y50013)

1 bottle

100 ml

수송

MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y50025)

MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12)

-80 ℃

MiraCell® CM Thawing Medium, MiraCell® CM Culture Medium v2

-20 ℃

MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12) Kit (Code Y50015)

MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12)

-80 ℃

MiraCell® CM Thawing Medium, MiraCell® CM Culture Medium

-20 ℃
보관
MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12) Kit (Code Y50025)
MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12): 액체 질소 보존
수령 후, 즉시 액체 질소에 보관하세요.
액체 질소 보존이 불가능하면, 바로 세포를 융해하여 배양하세요.

MiraCell® CM Thawing Medium, MiraCell® CM Culture Medium v2: -20℃ 이하, 융해 후 4℃
-20℃ 이하에서 동결 보존하고, 사용 전에 4℃에서 overnight으로 배지를 해동을 하세요
융해 후에는 4℃에서 보존하고, MiraCell® CM Thawing Medium은 1주일 이내,
MiraCell® CM Culture Medium v2는 1개월 이내 사용하세요(다시 동결 융해는 불가).

MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12) Kit (Code Y50015)
MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12): 액체 질소 보존
수령 후, 즉시 액체 질소에 보관하세요.
액체 질소 보존이 불가능하면, 바로 세포를 융해하여 배양하세요.

MiraCell® CM Thawing Medium, MiraCell® CM Culture Medium: -20℃ 이하, 융해 후 4℃
-20℃ 이하에서 동결 보존하고, 사용 전에 4℃에서 overnight으로 배지를 해동을 하세요
융해 후에는 4℃에서 보존하고, MiraCell® CM Thawing Medium은 1주일 이내,
MiraCell® CM Culture Medium는 1개월 이내 사용하세요(다시 동결 융해는 불가).
사용 상의 주의
MiraCell® Cardiomyocytes v2 (from ChiPSC12)Kit, MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12)Kit는 iHeart Japan㈜로부터 라이선스를 받고 Takara Bio가 제조, 판매하고 있습니다.


그림 1. MiraCell® Cardiomyocytes(from ChiPSC12)의 lot간 차이(3 lot 제품)의 확인
A) 심근 마커 cTnT(Cardiac TroponinT)양성률(해동 2일째)비교 결과
B) 해동 직후 및 해동 2일째 생존세포 수 비교 결과
C) MED Probes(Alpha MED Scientific Inc.)에서 FPDcF(Field potential duration corrected by Fridericia's formula)의 비교 결과 ※BPM35이상의 Probe를 사용
D) 각 lot의 IKr 저해제(E-4031)에 의한 FPDc10(FPDcF가 10% 더 연장할 때 약제 농도)비교 결과
어느 평가 방법에서도 lot 간 차이는 적은 것으로 확인됐다.


그림 2. MiraCell® Cardiomyocytes(from ChiPSC12)을 이용한 약제 반응성 시험
해동한 후의 심근세포를 MED Probes(Alpha MED Scientific Inc.)에 배양 4~9일째에 BPM (Beats per minute)이 35 이상을 나타내는 Probe에 대해, 세포 외 전위 측정장치를 이용하여 약물에 대한 반응성을 확인했다. IKr저해제 (E-4031), IKs억제제 (Chromanol 293B), Na채널 및 IKr저해제 (Mexiletine)에 대해서는 FPDcF의 연장과 Ca채널 저해제인 Verapamil에 대해서는 FPDcF의 단축이 확인됐다. 또한 E-4031 및 Mexiletine에 대해 고농도시 부정맥 형태의 파형 (EAD/TA; Early after depolarization/Triggered activity)이 관찰됐다.


그림 3. MiraCell® Cardiomyocytes(from ChiPSC12) 심근 결합 단백질의 발현 해석
Fibronectin으로 코팅된 배양 플레이트로 계대한 해동 후의 심근 세포를 4% paraformaldehyde로 고정하고 각 단백질에 특이적인 항체를 이용하여 염색했다. 그 결과 거의 모든 세포에서 심근 마커 단백질 cTnT가 발현하는 순도 높은 심근세포임이 확인되었다 (좌측). 또 MLC2A와 MLC2V의 염색상에서 MiraCell® Cardiomyocytes (from ChiPSC12)는 대부분의 세포에서 심실 근육 세포 마커인 MLC2V가 발현하는 것을 확인했고 (중앙). α-actinin염색으로 특징적 근절 구조가 확인되었다 (우측). 그 외 각종 이온 통로 유전자의 발현 (SCN5A, KCNQ1, CACNA1C, KCNH2등)에 대해서도 확인했다 (데이터 비공개).

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Cardiomyocyte
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초고순도 Cardiomyocyte from human iPSC