최적의 Lentivirus 생산을 위한 workflow

  1. Choose Lentiviral expression vector

  2. Clone target gene

PCR cloning의 원조 Any vector, Any insert, Any one Cloning 반응 시간 15분, 불필요한 염기 추가 없이 정확하게 Subcloning 없이 multiple cloning도 한번에

  3. Package Lentivirus

	Simple procedure - Lentiviral expression vector만 넣으면 패키징 준비 끝 No optimization - 최적화된 transfection 시약이 포함된 premix Consistent results - 일관된 transfection 효율에 따른 재현성 높은 실험 결과 High titer - 107 ~ 108 IFU/㎖의 고역가 Lentivirus 제작
Lenti-X™ Packaging Single Shots은 4세대 Lentiviral packaging mix와 Xfect™ Transfection Reagent가 혼합된 동결건조 상태의 single tube 제품으로, Lentiviral expression vector와 같이 packaging cell (Lenti-X™ 293T cell (Code 632180))에 transfection하면 간단하게 고역가의 Lentivirus를 제작할 수 있다.

  4. Titrate Lentivirus

Lentivirus는 생성 후 상층액으로 분비되기 때문에, 세포 파쇄없이 간편하게 세포 상층액에서 역가를 측정할 수 있다.
재현성 있는 실험 결과를 얻기 위해서는 정확한 역가를 측정하는 것이 필수적이다.

  5. Concentrate Lentivirus

  6. Transduce target cells with enhencer

  7. Analyze integration