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제품에 따른 검출 감도 및 항체 사용량 비교 – Western BLoT HRP Substrate 시리즈

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Application 4) 검출 감도 및 항체 사용량 비교 - 더 적은 양의 항체로 더 높은 감도 실현

HeLa cell lysate를 단계적으로 희석한 샘플로 SDS-PAGE를 진행한 후, 제품의 감도에 따라 항체 희석비율을 조정하여 Western blot 으로 GAPDH를 검출하였다.

[실험]
- Sample: HeLa cell lysate 10 ㎍부터 단계적으로 2배씩 희석
- Primary antibody: Anti-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase, clone 6C5 (1 ㎎/㎖) (Merck Millipore)
- Secondary antibody: Pierce Goat Anti-Mouse IgG (H+L) Peroxidase conjugated (0.8 ㎎/㎖)
- 항체희석비율


[결과]

(노출시간 20초, CCD camera로 검출)

Western BLoT Ultra Sensitive HRP Substrate (Code T7104A)를 사용하였을 때, 더 적은 양의 항체로 고감도의 검출이 가능함을 확인하였다.