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Home > Learning center > Lentivirus > 실험 가이드 > Lenti-X Concentrator video and overview

Lenti-X Concentrator video and overview

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Lenti-X™ Concentrator video 및 overview

Lenti-X™ Concentrator는 생산한 렌티바이러스를 농축하는 가장 좋은 방법이다. 렌티바이러스 상층액을 본 시약과 혼합 및 배양(incubation) 후, 일반 원심분리기를 이용하여 원심분리하면 농축이 가능하다. 아래 동영상에서는 본 제품을 사용하여 렌티바이러스를 농축하는 방법을 설명하고 있다.


■ 효율적인 농축 가능
Lenti-X™ Concentrator를 사용하면, 초원심분리기를 사용하지 않아도 렌티바이러스 역가를 최대 100배 증가시키고, 누락되는 바이러스 없이 기능은 유지하는 높은 회복력을 기대할 수 있다. 이 실험에서는 렌티바이러스 상층액을 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 3 ml을 300 ㎕로 농축하였고, 그 결과 역가는 ~100배 증가했으며, 렌티바이러스의 90% 이상이 농축 후에도 그 기능을 유지하였다.


높은 수율로 효율적인 농축 가능
pLVX-ZsGreen1을 포함한 렌티바이러스를 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 농축하였다. 역가는 HT1080 세포에 감염시켜 측정하였으며, transduction 48시간 후, 감염된 세포의 ZsGreen1 발현을 유세포 분석 방법(flow cytometric analysis)으로 분석하였다. Lenti-X™ Concentrator로 농축하기 전과 후 역가는 Total IFU로 표기하였다.

■ Flexible to meet your needs
Lenti-X™ Concentrator는 렌티바이러스를 포함한 상층액의 부피와 역가에 구애받지 않고, 다양한 조건에서 사용할 수 있다. 본 실험에서는 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 대량의 렌티바이러스 상층액(250ml)을 2.5ml로 농축하였으며, 약 100배 농축된 역가를 확인하였다(Panel A). 또한 Panel B는 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 다양한 역가(높음, 중간, 낮음)를 가진 렌티바이러스를 농축했을 때, 모든 조건에서 유의미하게 역가가 증가되었음을 보여주었다.


다양한 샘플에서 효율적인 농축 가능
이 실험에서는 ZsGreen1을 발현하는 렌티바이러스를 사용하였다. 농축 전후의 샘플을 이용하여 HT1080 세포에 감염시키고, transduction 48시간 후 ZsGreen1 발현을 유세포 분석(flow cytometric analysis)하여 역가를 확인하였다. Panel A. 렌티바이러스를 포함하는 상층액을 250ml로 희석한 다음 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 2.5ml로 농축한 후 역가를 측정하였다. Panel B. 고농도의 렌티바이러스를 단계희석하여 제작한 바이러스액(높음, 중간, 낮음)을 Lenti-X™ Concentrator를 사용하여 각각 농축(10 ml → 100 ㎕) 하여 역가를 측정하였다. 각각의 역가는 농축 전후의 바이러스로 측정하였으며, 모두 손실없이 모두 회복 (recover) 됨을 확인하였다 (결과는 그래프에 표기).