※ 본 제품은 다카라바이오에서 인간 iPS 세포 유래 microglia의 제조 방법에 관한 전세계 독점 라이선스를 Shionogi Pharmaceutical Co., Ltd. 로부터 취득 후, 제조 판매하고 있습니다.
※ 본 제품은
Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System (Code Y30010)로 배양한
Cellartis® human iPS cell line 12 (ChiPSC12) Kit (Code Y00285)로부터 분화되었습니다.
- Central Nervous System (CNS, 중추신경계) 내 면역 반응 연구를 위한 hiPSC 유래 microglia
- Iba1, P2Y12와 같은 microglial marker의 높은 발현
- Microglia의 기능적 특징 확인 - Amyloid β 탐식 반응, lipopolysaccharide 자극에 의한 cytokine 방출, ATP에 의한 세포 이동
제품설명
Cellartis® Microglia는 인간 역분화줄기세포인 ChiPSC12로부터 분화된 microglia-like cell로써, yolk sac macrophage 발생 과정을 in vitro 상에서 재현하였다. 본 제품은 Microglia의 주요 marker인 Iba1, P2Y12를 높게 발현하고,
돌기 모양의 형태나 amyloid β 탐식능이 확인되는 등 실제 생체 내 세포에서 보이는 특성을 보인다. 또한, 생체 내 microglia에서 보이는 ATP 유도에 의한 migration 성질이나, lipopolysaccharide에 의해 cytokine을 방출하는 기능을 보유하고 있다.
그림 1. Cellartis® Microglia (from ChiPSC12) 세포 사진
그림 2. Microglia marker (Iba1, P2Y12)의 면역 염색
거의 모든 세포에서 Microglia marker인 Iba1, P2Y12 발현을 확인하였다. (Iba1 = green, P2Y12 = Red, Dapi (Nuclear) = blue)
그림 3. Cellartis® Microglia의 Amyloid β 탐식능 확인
2일간 배양한 Cellartis® Microglia를 이용하여, Amyloid β 탐식능을 확인하였다. (Amyloid β = yellow, Phalloidin = red, Dapi (Nuclear) = blue)
그림 4. Lipopolysaccharide에 의한 cytokine 방출 기능
2일간 배양한 Cellartis® Microglia (from ChiPSC12)의 lipopolysaccharide에 의한 cytokine 방출 기능을 평가하였다. 각 농도의 Lipopolysaccharide를 배지에 첨가한 후, IL-6, TNF-α와 IL-1β의 방출량을 측정한 결과, IL-6 및 TNF-α의 방출은
LPS 농도 의존적으로 확인되었으며, IL-1β의 방출은 LPS 30ng / ml 존재 하에서 BzATP 농도 의존적임을 나타냈다.
그림 5. ATP 유도에 의한 migration 능력
Cellartis® Microglia (from ChiPSC12)를 해동한 직후 세포에 Calcein AM 형광을 표지하였다. 이 후, Disposable Chemotaxis System (Neuro Probe HP, Code. 106-8)를 이용해 ATP 유도에 의한 migration 능력을 평가하였다.
Cellartis® Microglia (from ChiPSC12)는 0.1mM ATP 존재 하에서 chemotaxis를 보였다.
자세한 구성은 CoA를 참고하세요.
