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Cloned

T7 RNA Polymerase

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2540A	T7 RNA Polymerase	5,000 U	66,400원 ~~83,000원~~	08.28 ~ 10.31
Takara	2540B	T7 RNA Polymerase	25,000 U	370,000원

Product index

제품설명

본 효소는 T7 promoter를 포함한 이중 가닥 DNA를 주형, NTP를 기질로 사용하여 promoter 하류의 주형 DNA에 상보적인 단일 가닥 RNA를 합성한다. T7 promoter 서열에 높은 특이성을 보이고 다른 생물 유래의 promoter를 인식하지 않는다.

보존

-20℃

농도

50 U/㎕

형상

20 mM	Potassium Phosphate 완충용액 (pH7.9)
1 mM	DTT
0.1 mM	EDTA
100 mM	NaCl
50%	Glycerol

첨부 buffer 조성 (10x)

400 mM	Tris-HCl (pH8.0)
80 mM	MgCl₂
20 mM	Spermidine
50 mM	DTT [별첨]

활성의 정의

37℃, pH8.0에서 1 시간 동안 1 nmol의 [³H]GMP를 산성의 침전물로(acid-insoluble products) 합성하는 효소활성을 1 U으로 한다.

활성 측정용 반응액 조성

40 mM	Tris-HCl (pH8.0)
8 mM	MgCl₂
5 mM	DTT
2 mM	Spermidine
각 0.4 mM	ATP, UTP, CTP
0.4 mM	[³H]GTP
1 ㎍/50 ㎕	pT7-2 DNA

용도

- 단일 가닥 RNA의 합성
- 강하게 표식된 RNA probe 제작
- siRNA 전구체 제작
- RNA splicing 반응의 전구체 제작
- Cap analog를 primer로 이용한 capped mRNA의 제작

기원

Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T7 RNA polymerase gene

일반적 성질

- 분자량: 약 98,000
- subunit: single standed polypeptide
- 최적 pH: pH8.0
- 보조인자
Mg²⁺ (최적농도: 8 mM)
환원제 (5 mM DTT)
- 활성화제: 2 mM spermidine (4mM에서는 DNA와 공침)
- 저해제: MEM (10^-4 M), pCMB (5X10^-8 M)에서 불활성화

상대 활성

- 반응 온도와 상대 활성 (37℃을 100%로 했을 때)

반응 온도 (℃)	20	25	37
상대 활성 (%)	10	50	100

- pH와 상대활성

pH	7.5	7.7	7.8	8.0
상대 활성 (%)	17	62	70	100

Keyword :

수식효소／DNA Polymerase、RNA Polymerase

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