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의약품 원료 제조 및 품질 평가에 사용

RNase T1, AOF

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Takara
 2152A
 RNase T1, AOF
관련학술 구매하기 new 		100 KU
 113,000원 
Takara
 2152B
 RNase T1, AOF
관련학술 구매하기 new 		500 KU
 504,000원 

  • 구아닌(G) 염기의 3' 말단을 특이적으로 절단하는 RNA 분해효소
  • 플라스미드 제조 등 RNA 제거 과정이 필요한 제조 공정에 최적
  • Poly(A) 사슬 길이 분석 등 품질 평가에 사용 가능
  • 최종 조성액에 인체ㆍ동물 유래 성분 및 β-lactam 계열의 화합물을 포함하지 않음
제품설명
RNase T1, AOF (Animal Origin Free)는 단일 가닥 RNA 분자 내 구아닌(G) 염기를 특이적으로 인식하여 분해하는 endoribonuclease로, 구아닌 염기의 3' phosphodiester 결합을 가수분해한다.1) 본 효소의 활성은 금속이온이 필요하지 않으며, Mg2+, Ca2+ 등의 2가 금속 이온에 의해 활성이 저해된다.2)


그림 1. RNase T1에 의한 RNA 분해 결과 비교
본 제품과 타사 RNase T1을 이용하여 Bacterial carrier RNA 1 μg의 분해를 확인하였다.
각 효소를 반응액 (활성 측정용 반응액 조성 참조)에 각각 0.001, 0.01, 0.1, 1, 10 U씩 첨가하여 37 ℃에서 10분간 반응 후 아가로스 겔 전기 영동을 하였다.
그 결과, 효소 첨가량에 비례하여 RNA가 분해되는 것을 확인할 수 있었으며, RNA 분해능은 타사와 동등한 수준이었다.


그림 2. 효소의 절단 특이성 평가
형광 표지된 다양한RNA probe를 절단하여 본 제품과 타사 RNase T1, RNase A의 절단 특이성을 확인하였다. 반응액에 각각 효소 1 U씩 첨가하여 37℃에서 1시간 반응 후 형광 값을 측정하였다.
그 결과, 구아닌 (G) 염기가 포함된 probe만 절단하여 G 염기를 특이적으로 인식하고 분해하는 것을 확인하였다.
용도
  • DNA 시료에서 RNA 제거
  • mRNA의 Poly(A) 사슬 길이 분석
품질 관리
본 제품의 최종 조성액에는 인체ㆍ동물 유래 성분 및 β-lactam 계열의 화합물이 포함되어 있지 않습니다.
내용
50 mM   Tris-HCl, pH 7.5
50％       Glycerol
보관온도
－20 ℃
(주의사항: 냉ㆍ해동은 반복하지 않는다)
기원
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for Ribonuclease T1 from Aspergillus oryzae
일반적 특성
분자량: 약 11 kDa
최적 pH: 약 pH 7.5
활성의 정의
Carrier RNA를 기질로 하여 37℃, pH 7.5, 15분 동안 260 nm의 흡광도를 1.0 증가시키는 효소량을 1 U으로 한다.
활성 측정용 반응액 조성
50 mM   Tris-HCl, pH 7.5 (37℃)
2 mM   EDTA, pH 7.5
0.2 mg/ml   Carrier RNA
품질 관리 데이터
성능 테스트 결과는 각 lot의 CoA (Certificate of Analysis) 참고
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Keyword :
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