TaKaRa
로그인  |   회원가입  |   ID/PW 찾기  
제품명/제품코드
사이트내검색
Home > 전제품보기 > Genome Editing > CRISPR-Cas9 gene delivery > Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
Electroporation delivery를 위한 Cas9 단백질

Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
632640
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
3x100ug
901,000원  제조사 페이지로 바로가기 122911
Clontech
632641
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
100ug
376,000원  제조사 페이지로 바로가기

  • The Cas9 protein solution is sterile and well-tolerated by mammalian cells
  • Highly efficient editing when combined with Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code 632636)
  • Minimizes off-target effects-better than plasmid-based delivery systems
  • Works well in hard-to-transfect cell lines
제품설명
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)은 Streptococcus pyogenes 유래의 Cas9 재조합 단백질로써 CRISPR/Cas9 gene editing 실험에 사용할 수 있도록 C-terminal nuclear-localization signal (NLS) 변형이 되어 있다. Cas9-sgRNA ribonucleoprotein(RNP) 복합체의 electroporation은 빠른 시간 내 gene editing이 가능하도록 하며, 또한 off-target effect를 최소화 할 수 있다.
본 제품은 Transfection 시약에 의한 RNP delivery에도 적용 가능하며, 이 경우 Mirus의 TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000) 사용을 추천한다 (그림 4. 참조)

그림 1. Gene knockouts in the Cellartis hiPSC-18 cell line. The strength of the cleaved bands gives a semiquantitive estimate of the percentage of edited cells. As can be seen, the Guide-it recombinant Cas9, when combined with sgRNA from the Guide-it In Vitro Transcription Kit, provides consistent and effective gene editing for many targets. Numbers at the bottom of each gel represent gene editing efficiencies (expressed as a %) for the indicated RNPs.


그림 2. Homology-directed repair at the AAVS1 or CXCR4 genes. A template containing a HindIII restriction site was inserted into the AAVS1 gene, and a template containing both a HindIII and a BamHI restrictrion site was inserted into the CXCR4 gene. Gene targets were then amplified from target cells using PCR and analyzed by restriction digest. Editing efficiencies are shown above each positive well on the gel. The extra band in the BamHI digest of the CXCR4 gene is due to a second BamHI site already present in the wild-type gene before editing.


그림 3. Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)과 타사 Cas9 단백질의 Konck-out 효율 비교
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)과 타사의 Cas9 protein을 이용하여, Human iPS cell에서 CD81 유전자를 타겟하는 sgRNA-Cas9 RNP 복합체를 Neon Transfection System (Thermo Fisher Scientific)으로 Electroporation 도입하였다. 그 결과, 타사의 Cas9 단백질에 비하여 월등히 높은 Knock-out 효율을 얻을 수 있었다 (자사 실험데이터, n=2x3 times)


그림 4. Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)와 TransIT-X2를 이용한 iPS cell gene editing
PPIB (Cyclophili B)에 대한 2개의 guide RNA (gRNA)와 Cas9 protein (타사 제품 또는 Guide-it Recombinant Cas9 protein) 복합체 (RNP)를 형성하였다. 그 후, RNP 복합체를 TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000) (1㎕/well 첨가, 24-well plate, Mirus Bio) 를 이용하여 iPS cell (KOLF-2, Wellcome Trust Sanger Institute)에 Transfection 방식으로 도입하였다. 여러 농도의 guide RNA를 조합한 RNP 복합체 도입 후, T7E1 mismatch detection으로 절단 효율을 확인한 결과 타사 제품 대비하여 보다 높은 절단효율을 확인할 수 있었다.

* 보다 자세한 내용을 확인하시려면, 아래의 내용을 참조하세요
TransIT-X2와 Cas9단백질의 조합에 의한 효율적인 Genome Editing (클릭)
관련 제품
Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code 632636)
- Gene delivery에 적용가능한 10-20ug의 고수율, 고순도 sgRNA 합성
- sgRNA candidates 중 가장 editing 효율이 높은 sgRNA 스크리닝

TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000)
- DNA, siRNA, miRNA 각각 또는 Co-transfection 가능한 만능 Transfection 시약
- CRISPR/Cas9을 위한 sgRNA-Cas9 RNP delivery에도 효율적

Keyword : CRISPR,Cas9 protein,CRISPR/Cas9,CRISPR-Cas9,크리스퍼,gene editing,sgRNA
-
CRISPR-Cas9 gene delivery
Single vector를 이용한 효율적인 sgRNA, Cas9 발현
> CRISPR/Cas9 Plasmid System
Off-target effect 감소, Hard-to-transfect cell l..
> Guide-it™ CRISPR/Cas9 Gesicle Production System
Adeno-associated virus delivery-CRISRP/Cas9 syst..
> AAVpro® CRISPR/Cas9 Vector System
SaCas9를 이용한 AAV mediated CRISPR Genome Editi..
> AAVpro® CRISPR/SaCas9 Helper Free System (AAV2)
Lentivirus를 이용한 sgRNA, Cas9 gene delivery
> Lenti-X™ CRISPR/Cas9 System
Cas9 nuclease 검출을 위한 항체
> Guide-it™ Cas9 Poly/Mono clonal Antibody
mRNA, sgRNA, siRNA등 다양한 RNA transfection에 ..
> Xfect™ RNA Transfection Reagent
hiPS cell의 single cell 배양, 유전자 편집에 최적..
> Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
Electroporation delivery를 위한 Cas9 단백질
> Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
-