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게놈편집 후의 Monoallelic, biallelic indel 판정에

Genotype Confirmation Kit

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
632611
Guide-it™ Genotype Confirmation Kit
관련학술 구매하기 라이선스 
100 rxns
696,000원 
870,000원
가격할인
05.03 ~ 06.30
제조사 페이지로 바로가기
x32689, x33142, x33143

  • Genome Editing으로 생성된 Monoallelic, biallelic indel 동정
  • 재조합 Cas9 nuclease와 sgRNA로 in vitro cleavage를 이용하여 쉽게 Genotyping
  • target genomic DNA를 세포로부터 direct PCR하여 Genotyping 가능
제품설명
CRISPR/Cas9 genome editing (크리스퍼 게놈편집)은 타겟 유전자에 하나의 allele (monoallelic) 또는 두개의 allele (biallelic) 변이를 생성하는 것으로 알려져 있다. Guide-it Genotype Confirmation Kit (Code 632611)는 Genome Editing 후의 세포 클론에서 변이 유전자를 간편하게 Genotyping할 수 있는 제품으로, 한쪽 allele 변이 (monoallelic), 대립 allele 변이 (biallelic)를 구분할 수 있을 뿐만 아니라, Wild type (unchanged) 클론까지 구분할 수 있다.
Cas9과 single guide RNA (sgRNA)를 처리하여 게놈편집을 시행한 세포에서 타겟유전자를 direct PCR하여 증폭된 증폭산물 (amplicon)을 tube 내에서 재조합 Cas9과 sgRNA를 처리하여 in vitro cleavage를 수행한다. 그 후, 절단산물을 Agarose gel 전기영동을 시행함으로써 genotype을 판정할 수 있다.

* 본 제품에는 sgRNA를 합성하는 시약이 포함되어있지 않습니다. In vitro sgRNA 합성은 Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code 632635)을 이용하십시오.


그림 1. Guide-it Genotype Confirmation Kit의 원리 및 Workflow.


그림 2. in vitro Cas9/sgRNA 절단에 의한 Genotype 판정


그림 3. (그림 A) Genome Editing을 수행한 세포 (HEK293 Cells)의 Genotyping 결과 (그림 B) 그림 A로부터 획득, 선택한 클론의 시퀀싱 분석 결과
적용
  • CRISPR/Cas9 gene editing
  • Identification of monoallelic and biallelic mutations after CRISPR/Cas9 gene editing
구성품 (자세한 내용은 CoA를 참조하세요)
  • Extraction Buffer 1
  • Extraction Buffer 2
  • Guide-it Recombinant Cas9 Nuclease(500 ng/μ l)
  • 15X Cas9 Reaction Buffer
  • Terra PCR Direct Polymerase Mix(1.25 U/μ l)
  • 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP)
  • RNase-Free Water
  • 15X BSA
  • Monoallelic Mutant Control Fragment(20 ng/μ l)
  • Biallelic Mutant Control Fragment(20 ng/μ l)
  • Control Fragment(20 ng/μ l)
  • Control sgRNA(50 ng/μ l)
보존
-20℃




Keyword : Mutation 확인,genotyping,allele,monoalleic,bialleic,indel,NHEJ,KO,Knock out,Knockout,Knock-out,CRISPR,CRISPR/Cas9,Cas9,sgRNA,크리스퍼,gene editing,유전자편집

유전자 편집 후 확인
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Genome editing 이후 mutation 확인용
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약 4시간만에 간단하고 정밀하게 생성된 변이 ..
염기치환, 삽입 변이 검출
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게놈편집 후의 Monoallelic, biallelic indel ..
Genotype Confirmation Kit
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Indel (mutation) 서열 확인
Indel Identification Kit