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Home > 전제품보기 > PCR > 특수 PCR (Epigenetics, UNG 등) > TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
False positive 검출을 예방하기 위한

TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
6088
TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
관련학술 구매하기
200 회
336,800원 
421,000원
가격할인
09.01 ~ 10.29
6088_e.v1201Da-.pdf

제품 설명
TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit은 PCR의 기질로 dTTP 대신에 dUTP를 사용한 후, uracil을 포함한 DNA를 분해하는 효소인 UNG (Uracil-N-glycosylase)를 이용하여, 앞서 진행된 PCR 증폭 산물의 carryover에 의한 false positive 증폭을 방지하기 위한 제품이다.
PCR전에 UNG를 처리하면, 이전에 반응한 PCR 산물 (uracil을 포함)이 혼입되어도 UNG에 의해 분해되지만, 주형 DNA는 분해되지 않기 때문에, carryover의 영향을 받지 않고 PCR 증폭을 실시할 수 있다.
UNG는 uracil을 포함하고 있는 single strand DNA와 double strand DNA는 가수분해 하지만, RNA에는 작용하지 않는다. 본 제품은 UNG효소와 dUTP를 포함한 dNTP Mixture, MgCl2 용액으로 구성되어 있어, TaKaRa Taq™ Hot Start Version (Code R007A/B) 등의 Pol I형 PCR 효소와 조합해서 사용할 수 있다.
UNG에 의한 분해
PCR을 시작하기 전에 25℃, 10 분간 incubation하면, PCR 반응액에 혼입되어 있는 uracil을 포함한 PCR 산물은 UNG에 의해 가수분해 되어 deoxyribose sugar와 uracil 염기 사이의 N-glycosylic bond가 끊겨 탈필리미딘 부위가 생성된다. 이어서 95℃, 2분간 열처리하면, UNG를 실활시킴과 동시에 혼입된 DNA단편의 탈염기 부위에서 phosphate backbone이 가수분해되며 DNA가 절단, 분해된다.
내용 (200 회, 50 ㎕ 반응 시)

1. UNG (2 U/㎕)

100 ㎕

2. dU plus dNTP Mixture (12.5×)*

800 ㎕

3. MgCl2 (25 mM)

1 ㎖


*dU plus dNTP Mixture 조성

dUTP

7.5 mM

dATP

2.5 mM

dGTP

2.5 mM

dCTP

2.5 mM

보존 - 20℃
함께 사용하는 PCR 효소
TaKaRa Taq Hot Start Version (Code R007A), TaKaRa Taq (Code R001A) 등 Pol I형 PCR 효소의 사용을 추천
[주의] Proof reading 활성을 가지는 α형 효소는 uracil을 포함하는 주형에 결합해, PCR을 저해하는 경우가 있으므로, α형 PCR 효소 및 α형 PCR 효소를 함유하는 PCR 효소는 본 제품과 함께 사용하는 것을 권장하지 않습니다.
관련제품
- 구성품 별도 구매시
    : Uracil DNA Glycosylase (UNG), heat-labile
    : dU plus dNTP Mixture (12.5x)
- 함께 사용하면 좋은 PCR 효소
    : TaKaRa Taq™ Hot Start Version
    : TaKaRa Taq
- 1kb 이하의 PCR 산물에 최적의 agarose: NuSieve™ 3:1 Agarose
- 올라운드 Agarose: SeaKem® LE Agarose
- 5분만에 전기영동 완료! Precast gel system: FlashGel™ System
- 컴팩트한 gradient PCR 기기: TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® Touch

Keyword :

특수 PCR (Epigenetics, UNG 등)
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Bisulfite 처리 후의 DNA PCR 증폭에 최적
EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)
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특이성 높은 high-plex PCR에 최적
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False positive 검출을 예방하기 위한
TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit