TaKaRa
로그인  |   회원가입  |   ID/PW 찾기   |  제품상담문의  
제품명/제품코드
키워드검색
검색
닫기
  • 고객지원 
  • 업무안내│제품문의
  • 전화번호│02-2081-2510
  • Email     │support@takara.co.kr
  • 대전지사 
  • 업무안내│대전/충청지역 주문, 제품문의
  • 전화번호│042-828-6525
  • Email     │tkbd@takara.co.kr
  • 업무시간안내
  • [ 평  일 ] 09 : 00 ~ 18 : 00 │ [ 점심시간 ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • 토·일요일, 공휴일은 휴무입니다.
Home > 전제품보기 > cDNA 합성 > Reverse Transcription (Takara) > High fidelity RTase, PrimeScript™

High fidelity RTase, PrimeScript™

-

High fidelity RTase, PrimeScript™ 목적에 따라 선택 가능

 

범용적인 사용

고품질 cDNA 합성

Real Time PCR전용 cDNA 합성

제품명

PrimeScript™ 1st strand
cDNA Synthesis Kit

PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit

PrimeScript™ RT reagent Kit (perfect Real Time)

특징

- High fidelity RTase의 표준
- 강한 displacement, elongation activity
- 고차구조 RNA 적용 가능

- 악세서리 단백질로 비특이적 신장을 억제해 background를 더욱 줄인 고품질 cDNA 합성
- 길이가 긴 RNA의 full-length cDNA 합성 능력 강화
- 고차구조 RNA에 적용성 강화

- Real Time PCR 전용 cDNA 합성 최적
- 15분의 짧은 반응 시간

고품질
cDNA 합성

★★

★★★

★★

활성 저해
요인 극복

★★

★★★

★★

신장성

~ 13.5 kb

~ 13.5 kb

-

반응 온도

42

42

37

42℃ (37℃)의 낮은 반응온도로 RNA template의 손상을 최소화 하면서도 PrimeScript™의 높은 displacement activity와 신장성으로 고차구조나 길이가 긴 RNA 등에서도 background가 낮은 cDNA를 합성할 수 있다.

반응 시간

30 ~ 60

30 ~ 60

15



고성능 high fidelity RTase, PrimeScript™ 시리즈 특징

특징 1. 다양한 길이의 RNA에서 background를 최소화한 고품질의 cDNA 합성 (~ 13.5 kb)
PrimeScript™는 MMLV 유래의 RTase로 강력한 displacement activity와 신장성을 가지고 있다 (그림 1). 따라서, 길이가 길고 구조가 복잡한 RNA도 손상이 적은 낮은 반응온도 (42℃)에서 background를 최소화하여 고품질로 cDNA를 합성할 수 있다 (그림 2).

그림 1. 강력한 displacement activity

그림 2. 강력한 elongation activity로 full-length cDNA 합성

특징 2. 매우 높은 정확도로 에러율이 낮은 cDNA 합성
Reverse transcription은 다양한 실험의 시작단계이기 때문에 RNA 서열을 정확하게 cDNA로 합성하는 것이 중요하다. PrimeScript™는 high fidelity RTase로 cDNA를 정확하게 합성할 수 있기에 이후 cloning이나 sequencing 등에 실험 결과의 신뢰도를 높일 수 있다 (그림 3).

그림 3. 정확한 cDNA 합성 능력

특징 3. 고차구조 RNA 또는 GC-rich의 RNA에서도 뛰어난 cDNA 합성
길이가 길거나 구조가 복잡한 반복 구조 (AT rich, GC rich)를 가지고 있는 RNA는 고차구조를 형성하게 되고, 이는 RTase가 cDNA를 합성하는 과정을 저해할 수 있다. PrimeScript™는 RNA에 대한 비특이적 결합을 억제하여, primer가 annealing된 부분에만 결합하는 능력이 최적화 되어, 고차구조의 RNA에서도 합성 저해나, mis-priming 없이 효율적으로 cDNA를 합성할 수 있다. 따라서 고차구조의 RNA (그림 4) 또는 GC-rich의 RNA (그림 5)에서도 background가 낮은 고품질의 cDNA 합성이 가능하다.

그림 4. 고차구조의 RNA에도 뛰어난 cDNA 합성능력

그림 5. GC-rich 서열을 포함한 RNA에서도 뛰어난 cDNA 합성능력

특징 4. 소량의 샘플도 높은 효율로 cDNA 합성
PrimeScript™는 뛰어난 신장성을 바탕으로 높은 감도와 수율로 cDNA를 합성할 수 있다. 따라서 타겟 RNA의 길이가 길어도, 소량의 샘플에서도 고품질의 cDNA 합성이 가능하다.

그림 6. 신장성이 뛰어나 길이가 긴 cDNA 합성에도 최적

악세서리 단백질로 고차구조 RNA에 적용성이 개선된 PrimeScript™ II, PrimeScript™ IV


1. 악세서리 단백질 첨가를 통해 cDNA 합성 저해요인을 극복한 PrimeScript™ II
고차구조 RNA 또는 길이가 긴 RNA를 주형으로 사용하는 경우, 효소의 비특이적 결합, mis-priming에 의한 비특이적 합성 등으로 고품질 cDNA 합성이 저해된다. PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit (Code 6210A)는 PrimeScript™ RTase에 악세서리 단백질을 추가하여 이러한 cDNA 합성 저해요인을 최대한 억제하였다. PrimeScript™ II RTase를 사용하면 손상 걱정이 없는 낮은 반응 온도에서 (42℃) 고품질의 full-length의 cDNA를 합성할 수 있다. 또한 cDNA 합성 저해요인이 최대한 억제되었기에 반응액 조제 후 얼음위에 둔 채로 반응 시작까지 다소 시간이 지연되어도 비 특이적 반응에 의한 영향이 거의 없다.

2. 5x premix 형태로 Quick & Effectve 합성이 가능한 PrimeScript™ IV
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix (Code 6215A)는 PrimeScript™ II RTase에서 효소가 더욱 개량되어 기존 역전사 반응에서 필요했던 RNA denaturation 과정을 생략하고 15~30분 반응으로 RNA의 손상 없이 더 빠르게 고효율로 cDNA를 합성할 수 있게 되었다. 또한 5x premix의 형태로 제공되어 사용이 더욱 편리하고 저농도의 샘플에서 더욱 효과적으로 cDNA 합성이 가능하게 되었다.

Real Time PCR용 cDNA 합성 PrimeScript™ RT 시리즈

특징 1. Real Time PCR에 이상적인 PrimeScript™ RT 시리즈
Real Time PCR에서는 일반적으로 타겟 서열이 80~150bp (최대 300 bp)으로 짧다. 그렇기에 full-length의 cDNA를 합성하는 대신 Real Time PCR 전용 PrimeScript™ RT를 사용하면, 15분 반응으로 Real Time PCR에서 사용하기에 최적인 cDNA를 합성할 수 있다 (Figure 7).

Figure 7. Real Time PCR 전용 PrimeScript™ RT 시리즈의 뛰어난 감도, 빠른 합성 속도

PrimeScript™ 관련제품

PCR, cloning, sequencing 등을 위한 full length cDNA 합성

Code

제품명

특징

6215A

PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix

5x premix, Quick & Effective

6210A

PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit

고차구조 RNA 적용성 강화

6110A

PrimeScript™ 1st strand cDNA Synthesis Kit

Basic-스테디 셀러

2680A

PrimeScript™ Reverse Transcriptase

역전사 효소, buffer 구성



Real-Time PCR 전용 cDNA 합성

Code

제품명

특징

RR036A

PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)

5x premix, 저농도 샘플

RR047A

PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

gDNA 제거로 정확한 실험

RR037A

PrimeScript™ RT Reagent Kit (Perfect Real Time)

Basic- 15분 RT