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탁월한 신장능력을 가진 신개념 역전사 효소의 standard

PrimeScript™ Reverse Transcriptase

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2680A	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U	209,000원
Takara	2680B	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	40,000 U	752,400원

Product index

Reverse Transcription (Tak..
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- RNase-free Water
- RNase-OFF®

농도 200 U/㎕

형상

20 mM		Tris-HCl (pH7.8)
100 mM		NaCl
1 mM		EDTA
1 mM		DTT
50%		Glycerol(v/v)

보존 -20℃

5× PrimeScript Buffer (cDNA 합성용)

250 mM		Tris-HCl (pH8.3)
375 mM		KCl
15 mM		MgCl₂

제품설명

본 제품은 M-MLV(Moloney Murine Leukemia Virus) 유래의 Reverse Transcriptase를 기반으로 하여 다카라가 독자적으로 개발한 신규 역전사 효소이다. 본 제품은 신장성이 매우 뛰어나 긴 cDNA를 합성할 수 있다. 또, GC rich 등과 같이 cDNA 합성이 어려운 RNA에 대해서도 RNA가 분해될 우려가 있는 고온에서의 반응은 필요로 하지 않으며, 표준 역전사 반응 온도(42℃)에서 효율적으로 cDNA를 합성할 수 있다. 본 효소는 긴 cDNA의 조제나 full length cDNA의 비율이 높은 library 제작에 최적이다.

PrimeScrip RTase 이용 42℃ 반응온도로, 백그라운드가 낮은 고품질의 cDNA 합성 가능

RNA Ladder (1~12kb)를 주형으로, PrimeScript 및 타사 RTase를 이용하여 역전사 반응.

활성의 정의

Poly(rA)- oligo(dT)_12-18 를 주형/프라이머로 하여 37℃, 10분간 1 nmol의 [³H]dTTP를 합성기질로 사용하는 것을 효소 활성 1U으로 한다.

활성측정용 반응액 조성

50 mM		Tris-HCl (pH8.3)
75 mM		KCl
8 mM		MgCl₂
10 mM		DTT
20 ug/ml		(rA)n - (dT)_12-18
0.5 mM		[³H]dTTP
0.1%		NP-40

1st-strand cDNA 합성시험

표준 실험법(프로토콜)에 따라 랫트 뇌 유래의 Total RNA 100 ng을 주형으로 하여 Oligo dT 프라이머 50 pmol 및 본 효소 200 units을 이용하여 42℃에서 60분간 1st-strand cDNA 합성 반응을 한다. 이 cDNA 반응액을 주형으로 PCR 하여 아가로즈 겔에 전기 영동한 결과 12 kb의 size 위치에서 명확한 밴드를 확인하였다.

순도

1. 200 U의 본 효소와 1㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 1시간 반응시켜도 DNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.
2. 200 U의 본 효소와 1㎍의 supercoiled pBR322 DNA를 37℃, 1시간 반응시켜도 DNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.
3. 200 U의 본 효소와 1㎍의 23S 및 16S rRNA 혼합물을 37℃, 1시간 반응시켜도 RNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.

용도

- 1st-strand cDNA 합성
- cDNA probe 조제
- RT- PCR

정확도가 매우 높은 역전사효소

Keyword : 2640A

Reverse Transcription (Takara)

Reverse Transcriptase 선택가이드

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Oligo(dT) 15 primer