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cDNA 합성
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Reverse Transcription (Clontech)
> SMART MMLV Reverse Transcriptase
Ultra-Pure MMLV RTase
SMART MMLV Reverse Transcriptase
제조사
제품코드
제품명
용량
가격
(부가세별도)
비고
사용자매뉴얼
Clontech
639524
SMART MMLV Reverse Transcriptase
20,000 Units
498,000원
Product index
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그 외 관련제품 (RNA)
RNase-free Water
RNase-OFF®
최대 11.7 kb의 full-length cDNA합성
적은 양의 샘플 적용 가능
주형 RNA의 complexity 유지
일관된 성능을 보유한 Ultra-pure MMLV RTase
제품설명
SMART
®
MMLV Reverse Transcriptase는 초고순도 (ultra-pure)의 재조합 Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase (MMLV RTase)로, 다양한 실험법에 적용 가능하다. 본 제품은 고도로 정제된 fully active RTase로써 exogenous RNases나 nuclease가 혼입되어 있지 않으므로, template RNA의 분해를 방지할 수 있다. 그렇기 때문에 본 제품을 이용할 경우 기존의 RTase보다 더욱 더 높은 비율의 고순도의 full-length cDNA를 합성 가능하다. 즉, SMART MMLV RTase는 주형 RNA의 분해를 방지하는 동시에 거의 모든 전사물에서 고품질의 full-length cDNA (최대 11.7kb)를 합성할 수 있다.
본 제품은 실온보관이 가능한 동결건조 RT premix인
RNA to cDNA EcoDry™ Premix (Code 639543 외)
에 기반이 되는 역전사효소로, microarray probe 합성이나 real-time quantitative RT-PCR 등의 사용에 이상적이며 유전자 cloning이나 RACE 또는 일반적인 cDNA 합성과 library 구축에 적합하다.
그림 1. SMART
®
MMLV RTase의 타사대비 낮은 RNase 활성.
RNA ladder 를 SMART
®
MMLV RTase (Lanes 1 & 2)와 타사의 MMLV RTase (Lanes 3 & 4) 그리고 AMV RTase (Lanes 5 & 6) 200 units과 37°C에서 1시간 동안 배양한 다음 포름알데히드/아가로스 겔 전기영동으로 분석하였다. 온전한 RNA 밴드는 타사 제품 대비 SMART
®
MMLV RTase가 template RNA 분해 활성이 낮은 것을 보여준다. (Lane 7: negative control (효소 없이 buffer만). Lane 8: positive control.)
그림 2. SMART
®
MMLV RTase의 긴 full-length cDNA 합성.
SMART
®
MMLV RTase에 oligo(dT)18 primer를 이용하여 human brain Total RNA를 first-strand cDNA로 역전사했다 (패널 A). 생성된 단일 가닥 cDNA를 연속적으로 5배 희석하고 (25 ng ~1.6 pg의 RNA에 해당함) QTaq DNA Polymerase Mix와 NF1의 5’ 말단 근처 226bp 영역을 증폭시키는 유전자 특이적 primer를 사용하여 qPCR로 분석하였다 (패널 B). 해당 영역의 성공적인 증폭은 SMART
®
MMLV RTase가 NF1 유전자의 최소 11.7 kb를 역전사 할 수 있음을 보여준다.
내용
SMART
®
MMLV Reverse Transcriptase
5X First-Strand Buffer
100 mM DTT
보존
- 20 ℃
관련제품
실온보관이 가능한 동결건조 RT premix:
RNA to cDNA EcoDry™ Premix (Code 639543 외)
DEPC 처리하지 않는 RNA 취급용 물:
RNase-free Water (Code 9012)
SMART
®
MMLV RTase에 최적인 dNTP mix:
Advantage
®
UltraPure PCR Deoxynucleotide Mix (10 mM each dNTP) (Code 639125)
Applications
- Microarray
- Real-time PCR/qPCR
- Gene expression analysis
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Keyword :
Reverse Transcription (Clontech)
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