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Reverse Transcriptase XL (AMV)

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Life Sciences	2620A	Reverse Transcriptase XL (AMV)	500 U	300,000원

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농도 15~40 U/㎕

형상

200 mM	Potassium Phosphate (pH7.2)
2 mM	DTT
0.2%	Triton X-100
50%	Glycerol

보존

- 80。C 동결보존 (동결융해 반복에 따른 활성저하는 없으나 가능한 한 피할 것)
- 단기간인 경우 -20℃에 보존 가능.

첨부 Buffer 조성 (cDNA 합성용, 10×/ 5×)

250 mM	Tris-HCl (pH8.3)
500 mM	KCl
20 mM	DTT
50 mM	MgCl₂

* Full length cDNA 합성시에는 첨부 버퍼를 1/10로 희석하여 사용하세요.

기원

Avian myeloblastosis virus (AMV)

제품설명

본 제품은 AMV로부터 고도로 정제한 것이다. 약 10 kb의 긴 RNA (Poly(A)-tailed RNA Ladder (1.4~9.5 kb))를 주형으로 하는 cDNA 합성 반응계에서 40~70% 이상이 역전사되어 그 중 55~80%가 완전한 길이의 cDNA 합성하는 것을 marker에서 확인하였다. 본 제품은 second strand 합성 저해제로써 actinomycin D 이외에, 4 mM의 sodium pyrophosphate도 사용할 수 있는 점과 반응 최적온도가 높은 점에서 MMLV 유래의 역전사효소와 다르다.

활성의 정의

Poly(rA)· oligo(dT)를 각각 주형· 프라이머로 하여 37℃에서, 10분 동안 1 nmol의 dTMP를 합성기질로 사용하는 것을 효소활성 1 U으로 한다.

활성측정용 반응액 조성

50 mM	Tris-HCl (pH8.3)
40 mM	KCl
6 mM	MgCl₂
4 mM	DTT
0.4 mM	Poly(rA)· oligo(dT)_12-18
0.5 mM	[³H]dTTP

품질검정

1. cDNA 합성반응
poly(A)-tailed RNA Ladder(1.4~9.5 kb)를 주형으로 하는 cDNA 합성반응에 있어, 주형 DNA의 40%~70% 이상이 역전사되어 그 중 55%~80%가 완전한 길이이다.
2. RNase Assay
15 U의 본 효소와 1㎍ RNA Ladder (1.4~9.5 kb)와 37℃, 2시간 반응하여도 RNA 전기영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.
3. DNase Assay
50 U의 본 효소와 0.5㎍×174 RFI DNA HaeⅢ단편들을 37℃, 1시간 반응하여도 전기영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.

용도

- 1st strand cDNA의 합성
- RNA-PCR
- cDNA probe 조제

Keyword :

Reverse Transcription (Takara)

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