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SMART법을 이용한 Full-length cDNA 합성

Full length cDNA Synthesis Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Clontech	634925	SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit	10 회 (Package)	1,467,000원	재고소진 후 종매, 일시판매중지
Clontech	634926	SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit	20 회 (Package)	2,761,000원

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- RNase-OFF®

* SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit (Code 634925, 634926)으로 합성한 cDNA는 Pacific Biosciences NGS Platform에 적용 가능합니다.

1-2 ng의 매우 적은 total RNA에서 cDNA 증폭
Adaptor ligation 과정 없이 하나의 tube에서 하나의 반응 과정
DNase 처리 과정 불필요
cDNA 추출 또는 정제 과정 불필요
증폭하지 않은 시료의 진짜 유전자 대표성 유지에 최적
Full-length cDNA의 특이적인 농축

SMARTer & SMARTer Pico PCR cDNA Synthesis Kit는 PCR을 이용하여 ng 수준의 total RNA로부터 고품질의 cDNA를 합성하는 제품이다. 본 제품을 이용하면 1-2 ng의 total RNA에서 array용 probe제작, cDNA substraction, ”Virtual Northern” blots, cDNA sequencing 등 다양한 실험에 적용 가능한 고품질의 cDNA를 제작할 수 있다. SMARTer cDNA 합성에 기초가 되는 SMART (Switching Mechanism At 5、End of RNA Transcript) 기술은 특히 laser-capture microscopy sample, flow cytometry로 분류한 세포 등에서 추출된 극소량의 RNA를 이용한 실험에 유용하다.
SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit는 2 ng의 total RNA에서 cDNA를 합성할 수 있고, 극소량의 RNA (1 ng의 total RNA; 20 pg/μl) 를 이용하는 경우에는 SMARTer Pico PCR cDNA Synthesis Kit를 추천한다. SMARTer Pico 매뉴얼에는 1st strand 합성 후 정제 과정이 포함되어 있어 ss cDNA 전량을 모두 SMARTer PCR 증폭 과정에 사용할 수 있도록 되어 있다 (Table1).
SMARTer와 SMARTer Pico Kit 모두 1~2 μg 의 ds cDNA를 합성할 수 있다.

효율적이면서 정확한 SMARTer cDNA 증폭을 위해 Advantage 2 PCRKit (Cat. No. 639206 & 639207)을 추천한다. Advantage 2 PCR Kit 에는 buffer, dNTP, control template과 primer 세트, 그리고 cDNA 증폭에 적합한 Advantage 2 Polymerase Mix 가 포함되어 있다.

RNA/cDNA Quality Assay (Cat. No. 636841)는 실험을 시작하기 전 RNA의 quality를 확인할 수 있는 제품으로 RT-PCR을 이용하여 RNA 시료가 실험에 사용할 만큼 충분한 양의 full-length cDNA를 합성할 수 있는지를 직접 판단할 수 있다. 또한, 별도의 추가 장비가 필요 없기 때문에 유해한 formaldehyde gel을 사용하지 않아도 되는 장점이 있다.

Components & Storage Conditions

각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.

References

1. Diatchenko, L. et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:6025-6030.
2. Gurskaya, N. G. et al. (1996) Anal. Biochem. 240:90-97.

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