1.
RNase Inhibitor
40 U/μl
50 μl
2.
10×BAP Buffer
200 μl
3.
Alkaline Phosphatase (BAP)
20 μl
4.
0.1% BSA
0.1%
60 μl
5.
3' adaptor *1, *2
10 μl
6.
T4 RNA Ligation Buffer
600 μl
7.
T4 RNA Ligase
8.
5×T4 PNK Buffer
100 μl
9.
T4 Polynucleotide Kinase
10 U/μl
10.
5' adaptor *1
11.
5×RT Buffer
40 μl
12.
dNTP Mixture
각2.5 mM
90 μl
13.
PCR-R & RT-Primer *1, *3
50 pmol/μl
14.
M-MLV RTase (RNaseH free)
200 U/μl
15.
2×PCR Buffer
250 μl
16.
PCR Primer F *1
17.
TaKaRa Ex Taq HS
5 U/μl
18.
Control RNA *4
5 pmol/μl
19.
3 M Sodium Acetate (pH5.2)
20.
Dr. GenTLE Precipitation Carrier *5
80 μl
21.
2×B/W Buffer
2.7 ml
22.
MAGNOTEX-SA
23.
RNase-free dH2O
10 ml
*1
3' adaptor,5' adaptor,PCR Primer F및PCR-R & RT-Primer에는,Sse8387 I의 사이트가 추가되어 있다. PCR산물과 벡터를Sse8387 I과Pst I 로 절단하여 라이게이션 할 수 있다. 본 키트에는 제한효소와 클로닝용 벡터 등은 포함되지 않기 때문에 별도로 준비 해야 한다.
*2
3' adaptor는 biotin화 되어 있다.
*3
PCR용reverse primer, 역전사 primer로 사용해도 된다.
*4