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Home > 전제품보기 > Gene transfer (virus) > Adenovirus > Adeno-X qPCR titer 측정 Kit
Real Time PCR로 Genome copy 수를 신속하게 측정

Adeno-X qPCR titer 측정 Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
632252
Adeno-X qPCR Titration Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
200 회
657,000원 
821,000원
가격할인
11.01 ~ 12.07
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PT5005-1_092111.pdf

  • 재조합 adenovirus의 역가 측정을 위한 기능적인 qPCR 실험법
  • 4 시간 이내로 신속하게 바이러스 역가 측정
  • Plaque assay 또는 End-point dilution assay보다 더 빠르고 정확
Adeno-X qPCR Titration Kit
Adeno-X qPCR Titration Kit는 Adeno-X Expression System의 Ad5-based adenovirus vector로부터 생산된 adenovirus의 역가를 측정할 수 있는 매우 신속하고 정확한 방법이다 (1). 조작 과정은 Intercalater 방법으로 DNA 표준 곡선을 이용하여 준비된 바이러스 (crude lysates 또는 purified stock)의 genome copy 수를 측정한다 (Figure 1). 본 제품은 단 4시간 만에 결과를 얻을 수 있기 때문에 당일 바이러스를 농축과 동시에 정확하게 바이러스 역가를 측정하여 목적 세포로 감염 시킬 수 있다.
Adeno-X Rapid Titer Kit
Adeno-X Rapid Titer Kit는 항체를 이용하여 1 세대 E1-deleted adenovirus역가를 간단하고 신속하게 측정할 수 있다 (2). 본 제품은 감염된 세포를 hexon 특이적 항체로 염색하는 방법을 기반으로 하고 있다. Hexon 단백질은 adenoviral genome으로 유도되며 adenovirus 복제에 필요한 adenoviral capsid의 필수 구성 요소이다. 그러나 hexon 단백질의 발현은 E1 유전자 산물에 의존적이다. 따라서 감염된 세포만이 hexon 단백질을 생산하기 때문에 HEK293과 같은 E1 trans-complementing 세포 (3)는 감염된 활성을 측정하는데 사용될 수 있다. Rapid Titer 검출법은 실험 준비을 위하여 1~2 시간, 그리고 2 일 후 감염된 세포를 표식, 염색하고 측정하는데 추가 3 시간 정도 소요된다. 각 염색된 세포는 single infection unit와 일치한다 (Figure 2).


Figure 1. Flowchart of the procedures used for titrating adenoviral DNA with the Adeno-X qPCR Titration Kit.


Figure 2. With the Adeno-X Rapid Titer Kit, infected cells turn brown, so they are easily counted using a microscope. Healthy HEK 293 cells (5 x 105/ml) were added to each well (1 ml/well) of a 12-well culture plate and then infected with various dilutions of an adenovirus stock according to the Adeno-X Rapid Titer Protocol. Following a 48 hr incubation, infected cells were identified by adding mouse anti-hexon antibody, HRP-conjugated rat anti-mouse antibody, and DAB substrate. This microscope image, taken with a 20X objective, shows a field of infected cells in a well that received a 10-5 viral dilution.
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
References
1. Obtain Adenoviral Titers in Less than 4 hours (2009) Clontechniques XXIV(2):12-13.
2. Bewig, B. & Schmidt, W. E. (2000) Biotechniques 28(5):870-873.
3. Graham, F. L. et al. (1977) J. Gen. Virol. 36(1):59-74.

Keyword :
-
Adenovirus
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