- È¿¼Ò ¹ÝÀÀÀ¸·Î È¿¸ðÀÇ ¼¼Æ÷º® ºÐÇØ
- ¾×ü Áú¼Ò ¹× glass bead¸¦ »ç¿ëÇÏ´Â ¹æ¹ý¿¡ ºñÇØ °£´ÜÇÑ protocol
- ´Ù¼öÀÇ »ùÇÃÀÇ Ã³¸®¿¡ ÃÖÀû
- RNAiso Plus (Code 9109 ¿Ü)¿Í °°ÀÌ »ç¿ë
Á¦Ç°¼³¸í
Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)´Â RNAiso Plus (Code 9109 ¿Ü)·Î È¿¸ð¿¡¼ °í¼øµµÀÇ total RNA¸¦ Á¤Á¦ÇÒ ¶§ °°ÀÌ »ç¿ëÇÏ´Â Àüó¸® ½Ã¾àÀÌ´Ù.
º» Á¦Ç°À» »ç¿ëÇÑ È¿¸ð »ùÇÃÀÇ Àüó¸® °úÁ¤Àº ¿ø½É ºÐ¸®¿¡ ÀÇÇÑ È¿¸ðÀÇ wash¿Í ȸ¼ö, Yeast Processing Enzyme Solution (¼¼Æ÷ º® ºÐÇØ È¿¼Ò)¿¡ ÀÇÇÑ È¿¸ðÀÇ ¼¼Æ÷º® ºÐÇØ ¼ø¼·Î ÁøÇàµÈ´Ù. À̶§ È¿¼Ò ¹ÝÀÀÀ¸·Î È¿¸ðÀÇ ¼¼Æ÷º®À» ºÐÇØÇϱ⠶§¹®¿¡ glass bead ¹× ¾×ü Áú¼Ò¸¦ »ç¿ëÇÑ º¹ÀâÇÑ °úÁ¤À» »ý·«ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
ÀÌ Á¦Ç°À» »ç¿ëÇØ È¿¸ð (Saccharomyces, Candida, Pichiaµî)¿¡¼ °í¼øµµÀÇ total RNA¸¦ Á¤Á¦ÇØ ¿©·¯ À¯Àü°øÇÐ ½ÇÇè (RT-PCR µî)¿¡ È°¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. ÀϹÝÀûÀÎ Á¶°Ç¿¡¼´Â 2~5×107ÀÇ exponential phaseÀÇ Saccharomyces cerevisiaeÈ¿¸ð¿¡¼ 10~20§¶ÀÇ °í¼øµµ total RNA¸¦ Á¤Á¦ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
ÀÌ Á¦Ç°Àº ¿À·£ ½Ã°£ ¹è¾çÇÑ È¿¸ð ¼¼Æ÷ ¹× µ¿°á »óÅÂÀÇ È¿¸ð ¼¼Æ÷ÀÇ total RNA Á¤Á¦¿¡µµ »ç¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ°í, ½Å¼±ÇÑ exponential phaseÀÇ È¿¸ð »ùÇÃÀ» »ç¿ëÇÏ´Â °æ¿ì Á¤Á¦½Ã°£À» ´õ¿í ´ÜÃàÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
¡ØRNA ÃßÃ⠽þ࿡ ´ëÇؼ
ÀÌ Á¦Ç°Àº RNAiso Plus (Code 9108/9109)¿Í ÇÔ²² »ç¿ëÇÏ´Â °ÍÀ» Ãßõ µå¸®¸ç, ´Ù¸¥ RNA ÃßÃ⠽þà°úÀÇ È£È¯¼ºÀº È®ÀεÇÁö ¾Ê¾Ò½À´Ï´Ù.
³»¿ë
- Yeast Processing Buffer
- Yeast Processing Enzyme Solution
- RNase-free DNase I
*1
- 10xDNase I Buffer
*2
*1 ¼¼Æ÷ º® ºÐÇØ È¿¼Ò¸¦ Æ÷ÇÔÇÑ´Ù.
*2 RNAiso Plus¿¡¼ total RNA Á¶Á¦ ½Ã ÇÊ¿ä¿¡ µû¶ó »ç¿ëÇÑ´Ù.
º¸Á¸ £20¡É
°ü·ÃÁ¦Ç°
- AGPC¹ýÀ» È°¿ëÇÑ RNA Á¤Á¦ Kit, RNAiso Plus (Code 9108/9109)
- High fidelity RTase PrimeScrip™ ½Ã¸®Áî, Reverse Transcriptase ¼±Åð¡À̵å
- Á¤È®µµ´Â ±âº», ¹ÝÀÀ ¼Óµµ°¡ ´õ¿í »¡¶óÁø PCR È¿¼Ò, PrimeSTAR® GXL Premix Fast, Dye plus (Code R052A)
- Á¤È®ÇÑ Á¤·®À» À§ÇÑ Tli RNaseH premixed qPCR Á¦Ç°, Dye-based / Probe-based