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Large RNA & CRISPR guide RNA용transfection 시약

TransIT®-mRNA Transfection Kit

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Mirus
MIR 2225
TransIT-mRNA Transfection Kit
관련학술 구매하기
0.4 ml
가격문의   ml036_transit_mrna_transfection_kit.pdf
Mirus
MIR 2250
TransIT-mRNA Transfection Kit
관련학술 구매하기 샘플신청 
1.0 ml
가격문의  
Mirus
MIR 2255
TransIT-mRNA Transfection Kit
관련학술 구매하기
1.0 ml×5
가격문의  
Mirus
MIR 2256
TransIT-mRNA Transfection Kit
관련학술 구매하기
1.0 ml×10
가격문의  

제품설명
RNA delivery는 직접 세포질에 RNA를 전달해 단백질을 발현시키기 때문에 다양한 transcriptional regulation을 피할 수 있다. 본 제품은 다양한 타입의 cell에 낮은 독성으로 RNA를 transfection하기 위해 개발한 시약으로 mRNA 혹은 viral RNA 등 다양한 크기의 RNA 분자 (2~10 kb)에 적용할 수 있다. 따라서 일시적인 단백질 발현, 바이러스 생산 및 복제 연구 등 다양한 분야에 사용될 수 있다.
내용
(#MIR 2250 기준; 1.0 ㎖)
구성품

용량

TransIT®-mRNA Reagent

1 x 1.0 ㎖

mRNA Boost Reagent

1 x 1.0 ㎖

보존: 4 ℃
관련제품
- 한번에 200 ㎍ mRNA 합성, 고수율 in vitro transcription: Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit (Code 6144)
- IVT용 Plasmid template을 간단하게 제작하는 Kit: Cloning Kit for mRNA Template (Code 6143)
- Capping enzyme, uncapped RNA -> cap-0 RNA: Vaccinia Capping Enzyme (Code 2460A)
- Capping enzyme, cap-0 RNA -> cap-1 RNA: mRNA Cap 2-O-Methyltransferase (Code 2470A)
- 포유동물 세포용 Electroporation 시약: Ingenio® Electroporation Solution (Code MIR 50111)
실험 데이터

그림 1. 타사 대비 높은 도입효율과 낮은 독성을 보이는 TransIT®-mRNA Transfection Kit. TransIT®-mRNA Transfection Kit, Lipofectamine® RNAiMAX (Life Technologies), Stemfect™ RNA Transfection Kit (Stemgent) 세가지 시약을 사용해 14일간 동일한 population의 BJ fibroblasts에 RNA를 매일 transfection하였다 (capping 및 polyadenylation이 완료된 EGFP mRNA - pseudouridine과 5mC modified bases (Trilink Biotechnologies, Inc.) 사용). 실험은 12-well plate에서 1 ㎍ RNA를 각각 시약의 최적 비율로 transfection하였고, transfection 후 매일 같은 위치에서 GFP와 위상차 이미지를 촬영하였다. Transfection 효율은 14회의 daily transfection 후 flow cytometry (Guava® easyCyte™ 5HT)를 사용해 측정하였고 (blue bar), 세포 생존율을 flow cytometry를 통해 cell count로 측정하였다 (black line grey bar). error bar는 3 반복 실험한 well의 표준편차를 의미한다. 그 결과 TransIT®-mRNA Transfection Kit는 14일간의 장기간의 반복되는 실험에서 높은 도입효율과 낮은 독성으로 타사 대비 높은 효율을 보였다.


그림 2. Luciferase mRNA를 다양한 Cell에 도입 후 확인한 high level luciferase expression 결과. 12-well plate에 배양된 세포에 capping 및 polyadenylation이 완료된 luciferase encoding mRNA를 TransIT®-mRNA Transfection Kit로 transfection 한 결과이다. Transfection 후 약 18시간 뒤 세포를 회수해 well당 total luciferase activity를 측정하였다. 그 결과 다양한 cell에서 높은 효율로 유전자를 발현시킬 수 있었다.


그림 3. CHO-K1 Cell에 LacZ encoding mRNA를 transfection한 결과. CHO-K1 세포에 (A) mock(B) capping 및 polyadenylation이 완료된 LacZ encoding mRNA를 각각 TransIT®-mRNA Transfection Kit로 transfection 한 결과이다. Transfection 후 약 18 시간 뒤 이 세포들을 Beta-gal Staining Kit로 염색해 LacZ가 transfection된 세포를 확인했다. 그 결과 LacZ mRNA를 도입한 cell만 효과적으로 스크리닝 할 수 있었다.

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도입물질에 따른 도입시약
>
Large RNA & CRISPR guide RNA용transfection ..
TransIT®-mRNA Transfection Kit
>
mRNA, sgRNA, siRNA등 다양한 RNA transfection..
Xfect™ RNA Transfection Reagent