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Bradford 방식의 단백질 정량 Kit

TaKaRa Bradford Protein Assay Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	T9310A	TaKaRa Bradford Protein Assay Kit	500회	121,000원

Bradford 방식의 Protein assay Kit
간단한 조작으로 빠르게 넓은 범위, 1~ 1,000 μg/㎖, 단백질 정량 가능

제품 설명

TaKaRa Bradford Protein Assay Kit는 coomassie dye를 사용하는 Bradford 방식의 제품으로, 간단한 방법으로 신속하게 1~1,000 μg/㎖의 단백질 농도를 정량할 수 있다.
본 제품은 Coomassie dye가 단백질과 결합할 때 흡광도가 변하는 원리(465nm→595nm)를 이용한다. 이 변화는 용액 내의 단백질의 양과 비례하기 때문에, 585nm의 흡광도를 측정하여 용액의 단백질 농도를 정량할 수 있다. 단백질과 색소 복합체는 반응 시작 후 5분에서 최대 60분까지 안정하다.
본 제품은 샘플에 환원제가 존재하여도 측정 가능하지만, 계면활성제가 존재한다면 정량값이 부정확하게 되므로 주의가 필요하다(공존물질에 의한 영향에 대해서는 <표.1> 참조).
또한 단백질에 따른 발색률이 다르기 때문에 주의해야 한다 (다양한 단백질의 발색 비교는 <표.2> 참고).

내용

본 제품은 1 ㎖ 반응 시 500회, Microtiter plate를 이용한 200 ㎕ 반응 시 2,500회의 측정을 할 수 있다. Low-concentration 프로토콜을 이용하면 1 ㎖ 반응 시 1,000회, 200 ㎕ 반응 시 최대 5,000회의 측정이 가능하다.

1. Bradford Dye Reagent	250 ㎖×2
2. BSA Standard Solution (2 mg/㎖)^*	1 ㎖×10

^* : BSA Standard Solution은 안정화를 위해 0.9% NaCl, 0.05% NaN₃ 를 포함한다.

보존

4℃, 냉장 보관 하십시오.

제품 이외에 필요한 것

Spectrophotometer and compatible 1 ㎖ cuvette
Microplate reader and compatible microplate
Benchtop centrifuge
Microtubes (2 ㎖ or 1.5 ㎖)
Spectrophotometer or microplate reader

단백질 정량 샘플에 공존 물질에 의한 영향

본 제품은 환원제에 의한 영향은 적게 받지만, 높은 농도의 계면활성제는 측정에 영향을 끼친다.
<표. 1>은 측정에 영향을 끼치지 않는 공존물질의 농도를 나타낸 것이다.
<표. 1>에는 측정에 영향을 주지 않는 농도를 표기하였다.

<표. 1> 단백질 정량 샘플의 공존물질 허용 농도

단백질 종류에 따른 영향

단백질과 색소의 결합은 주로 단백질 중 염기성 아미노산 또는 방향족 아미노산과 색소의 결합 (특히 아르기닌과의 결합)에 의한 것이므로 단백질 종류에 따라 발색률이 다르다.
<그림. 1>은 일반적인 표준물질로 사용되는 BSA (Bovine Serum Albumin)와 BGG (Bovine Gamma Globulin)의 표준 곡선이다. 또한 <표. 2>에는 15종류의 단백질을 BSA의 발색률과 비교하여 나타내었다.

<그림. 1> BSA와 BGG의 표준곡선

<표. 2> BSA에 대한 다양한 단백질의 발색률 비교

*Ratio: (각종 단백질의 흡광도 평균값) / (BSA의 흡광도의 평균값)

Keyword :

단백질 검출, 정량, 해석


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