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Baculovirus 역가(Genomic DNA copy 수)를 약 4 시간에 측정

BacPAK qPCR Titer 측정 Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
631414
BacPAK qPCR Titration Kit
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
200 회
833,000원  제조사 페이지로 바로가기 17519

  • 빠른 titration kit를 이용하여 4 시간 만에 바이러스 역가를 측정
  • 하루 안에 virus의 역가 측정 및 감염까지 가능
  • AcMNPV 기반의 모든 baculovirus에도 적합
BacPAK qPCR Titration Kit는 바이러스의 역가 측정을 위한 매우 빠르고 간단한 방법을 제공한다. 이 kit는 Real Time PCR과 Intercalater 기술을 사용하여 viral genome을 구성하기 전에 빠르게 DNA 정제 단계를 진행한다 (Figure 1). 표준 역가 측정 방법은 측정을 완료하기까지 최대 10 일이 소요되는 반면에, 본 제품을 이용하면 4 시간만에 역가측정이 완료되며 AcMNPV 기반의 어떤 baculoviral vector에도 사용 가능하다. Real Time PCR법을 이용하여 바이러스 농축과 목적 세포 감염 사이의 시간 간격을 크게 줄여 당일에 모두 수행할 수 있도록 해준다. 바이러스의 감염능력이 저하되는 것을 피할 수 있고, 정확한 multiplicity of infection (MOI)으로 목적 세포를 감염시켜 더 일관된 결과를 도출할 수 있다 (1).

BacPAK qPCR Titration Kit는 조정된 DNA standard curve로부터 baculovirus 준비 단계에 필요한 viral genome copy수를 측정하도록 한다 (Figure2). 절차는 간단하여 viral DNA와 BacPAK control DNA는 단계적으로 희석(serial dilution)하여 qPCR을 준비하고, 각 바이러스 시료의 DNA copy 수는 Figure 2에 나타난 대로 각각의 copy 수에 대한 희석된 control 시료의 Ct 값을 곡선화하여 생성되는 standard curve와 Ct 값을 비교하여 측정된다. 간단하고, 재현성이 높으며, 짧은 측정 시간으로 BacPAK qPCR Titration Kit는 baculoviral DNA titer 측정에 아주 적합하다.


Figure 1. The BacPAK qPCR Titration Kit protocol.


Figure 2. The BacPAK qPCR Titration Kit exhibits a wide dynamic range. The BacPAK DNA Control Template was serially diluted from 108 to 103 copies per sample and analyzed with the BacPAK qPCR Titration Kit. The amplification plots (Panel A) show a wide dynamic range of at least 6 orders of magnitude with no NTC (No-Template Control) background. The standard curve (Panel B) obtained by plotting the Ct values (determined from the amplification plots in Panel A) against the log of the DNA copy number in each sample, demonstrates a strong linear correlation between the Ct and the DNA copy number (log scale), with R2 = 1.000 and a PCR efficiency of 100%.


* Clontech offers two different kits for baculovirus titration: the BacPAK Baculovirus Rapid Titer Kit (Cat. No. 631406) utilizes a standard immunological assay to accurately identify virus-infected cells, and the BacPAK qPCR Titration Kit (Cat. No. 631414) measures viral DNA copies via SYBR qPCR.
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
References
1. Rapid & Accurate Baculovirus Titration (2009) Clontechniques XXIV(3):8-9.

Keyword :
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