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BacPAK Baculovirus 발현 시스템

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
631402
BacPAK Baculovirus Expression System
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1 Set
1,540,000원  제조사 페이지로 바로가기 17511
Clontech
631401
BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest)
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5 회
912,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
631411
IPLB-Sf21 Insect Cells
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1 vial
187,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
631404
BacPAK Grace's Basic Medium
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500 ml
264,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
631721
X-GLUC
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100 mg
595,000원  제조사 페이지로 바로가기

BacPAK Baculovirus Expression System은 곤충 숙주 세포에서 재조합 단백질을 고발현 (배양액 L 당 1-500 mg의 단백질)시킨다 (1, 2). Clontech의 BacPAK System은 3 가지 중요한 장점을 갖고 있다.
  • 재조합 단백질의 높은 회수율 : 곤충 숙주 세포는 많은 양의 목적 단백질을 생산한다.
  • 생체 단백질과의 유사성이 높음 : 곤충 숙주 세포가 mammalian 세포와 유사한 번역 후 (post-translational)의 과정을 제공하기 때문에 발현된 재조합 단백질은 일반적인 생체 단백질과 구조적으로 유사할 뿐만 아니라, 생물학적 활성과 면역학적 반응성 또한 유사하다.
  • 높은 재조합 효율 : 형질 전환된 세포에 의해 생성되는 바이러스의 90% 이상은 목적 단백질을 생산한다. BacPAK6 Viral DNA는 바이러스와 전달된 vector 사이의 재조합을 유도하여 높은 재조합 효율을 나타내게 된다.

Figure 1. Protein production from recombinant viruses generated using the BacPAK Baculovirus Expression System. Recombinant viruses were obtained by cotransfection of transfer vectors with BacPAK6 Viral DNA (Bsu36 I digest), followed by amplification in Sf21 cells. The SDS PAGE analysis of cellular lysates was performed 48 hr after infection of the Sf21 cultures. Lane 1: uninfected Sf21 cells. Lane 2: Sf21 cells infected with wild-type AcMNPV virus. Lane 3: Sf21 cells infected with nonrecombinant BacPAK6 virus. Lane 4: Sf21 cells infected with BacPAK8-GUS recombinant virus. Lane 5: purified CAT protein. Lane 6: Sf21 cells infected with BacPAK9-CAT recombinant virus. Lane M: molecular weight marker.
BacPAK 방법
목적 유전자는 shuttle vector로 삽입되고 linearized BacPAK6 Viral DNA와 함께 곤충 숙주 세포로 cotransfection 된다. BacPAK6 DNA에는 baculovirus genome의 필수 요소가 없지만 DNA가 vector와 재조합하면 필수 요소가 복구되고 목적 유전자가 baculovirus genome으로 끼어들어간다. 재조합 후, 몇 개의 바이러스 plaque를 선택, 정제하여 재조합 표현형을 확인한다. 그런 후 새로 분리된 재조합 바이러스를 증폭하여 곤충 세포 배양액에 감염시키면 많은 양의 목적 단백질을 만들어낼 수 있다.

BacPAK System은 BacPAK6 Viral DNA transfer vector, 재조합 단백질 생산에 필요한 곤충 숙주세포, 고효율 형질전환을 위한 Bacfectin Transfection 시약, sequencing과 PCR을 위한 primer를 포함하고 있다. Baculovirus titer를 빠르게 측정하기 위해서 BacPAK Rapid Titer Kit (Cat. No. 631406)나 BacPAK qPCR Titration Kit (Cat. No. 631414)를 추천한다. BacPAK6 Viral DNA (Cat. No. 631401)와 IPLB-Sf21 Insect Cells (Cat. No. 631411)는 별도 구매도 가능하다.


Figure 2. BacPAK6 Viral DNA map.
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
References
1. Kitts, P. A. & Possee, R. D. (1993) Biotechniques 15(5):810-817.
2. Kitts, P. A. et al. (1990) Nucleic Acids Res. 18:5667-5672.

Keyword :
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