Á¦Ç°¼³¸í
B±º ¿ëÇ÷¼º ¿¬¼â»ó ±¸±Õ (Streptococcus agalactiae; GBS)Àº ±×¶÷ ¾ç¼º ¹ÚÅ׸®¾Æ·Î Àΰ£ÀÇ »ý½Ä±â ¹× Àå°ü¿¡ ÀÖ´Â »óÁÖ±ÕÀÌÁö¸¸, Ãâ»ý Á÷ÈÄ ½Å»ý¾ÆÀÇ ÆÐÇ÷ÁõÀ̳ª
»ýÈÄ 3°³¿ù±îÁö ³ªÅ¸³¯ ¼ö ÀÖ´Â ³ú¼ö¸·¿°, ¶Ç´Â ³ëÀΠħ½À¼º °¨¿°Áõ µîÀÇ ÁÖ¿ä ¿øÀαÕÀÌ´Ù. GBS °ËÃâÀº ÁÖ·Î ¹è¾çÀ» ÅëÇØ °Ë»çÇÏÁö¸¸, °á°ú¸¦ ¾ò±â±îÁö ½Ã°£ÀÌ °É¸®°í,
°ËÃâ °¨µµ°¡ ³·Àº °ÍÀÌ ¹®Á¦½Ã µÇ°í ÀÖ´Ù.
ÀÌ Á¦Ç°Àº GBS À¯·¡ÀÇ È÷½ºÆ¼µò Å°³ªÁ¦(histidine kinase)¸¦ ÄÚµåÇÏ´Â dltS À¯ÀüÀÚ¸¦ °ËÃâ´ë»óÀ¸·Î, Real time PCRÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© GBS¸¦ ¸Á¶óÀûÀÌ°í ƯÀÌÀûÀ¸·Î
À¯ÀüÀÚ ¼öÁØ¿¡¼ ½Å¼ÓÇÏ°Ô °ËÃâÇÒ ¼ö ÀÖµµ·Ï °³¹ßµÇ¾ú´Ù.
°ËÃâ¿¡´Â cycling probe¹ýÀ» »ç¿ëÇÏ°í, GBS À¯·¡ dltS À¯ÀüÀÚ¸¦ °ËÃâÇϱâ À§ÇÑ FAMÇ¥½Ä probe ¿Ü¿¡µµ ÀÎÅͳΠÄÁÆ®·Ñ(Internal positive control, IPC)°ú
ÀÎÅͳΠÄÁÆ®·Ñ(IPC) °ËÃâ¿ë ROXÇ¥½Ä probe°¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ´Ù. µÎ ÆÄÀåÀ» µ¿½Ã¿¡ ¸ð´ÏÅ͸µÇÏ¿© 1 °³ÀÇ Æ©ºê¿¡¼ GBS ƯÀÌÀûÀÎ dltS À¯ÀüÀÚÀÇ °ËÃâ°ú
ÀÎÅͳΠÄÁÆ®·Ñ(IPC)ÀÇ µ¿½Ã¿¡ °ËÃâÇÏ¿© °¡Â¥ À½¼º(false positive) ¸ð´ÏÅ͸µÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù. ½Ç½Ã°£ °Ë»öÀ̹ǷÎ, Àü±â ¿µµ¿ÀÌ ºÒÇÊ¿äÇÏ¸ç ½Å¼ÓÇÏ°Ô °á°ú¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
ÀÌ Á¦Ç°Àº ŰŸÀÚÅä´ëÇРŰŸÀÚÅä »ý¸í°úÇבּ¸¼Ò ¿ìºÎīŸ Å°¹ÌÄÚ ±³¼öÀÇ °¨¼ö·Î Real Time PCRÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© °ËÃâÇÏ´Â Á¦Ç°À¸·Î °³¹ßµÇ¾ú½À´Ï´Ù.
³»¿ë
(50 ¹ÝÀÀºÐ, 25 ¥ìl ¹ÝÀÀ½Ã)
¡Ü |
1. |
2¡¿CycleavePCR Reaction Mixture |
625 ¥ìl |
¡¡ |
¡Ü |
2. |
dltS Primer/Probe Mix£¨FAM¡¢ROX£© |
100 ¥ìl |
£ª1 |
¡Û |
3. |
dH2O |
500 ¥ìl |
¡¡ |
¡Ü |
4. |
dltS Positive Control |
60 ¥ìl |
£¨30üÞÝ£©£ª2 |
*1 Çü±¤ Ç¥½Ä probe¸¦ Æ÷ÇÔÇÏ°í Àֱ⠶§¹®¿¡, Â÷±¤¿¡ À¯ÀÇÇϽʽÿä.
*2 °³ºÀ ÈÄ¿¡´Â Positive ControlÀÇ ¿À¿°À» ¹æÁöÇϱâ À§ÇØ ±¸¼º¿ä¼Ò 1 ~ 3°ú ±¸¼º ¿ä¼Ò 4¸¦ º°µµÀÇ »óÀÚ¿¡ ³Ö¾î °¢°¢ -20 ¡É¿¡¼ º¸Á¸ÇØ ÁÖ¼¼¿ä.
Àåºñ ÀÌ¿Ü¿¡ ÇÊ¿äÇÑ Àåºñ, ½Ã¾à (ÁÖ¿äÇÑ ³»¿ë¸¸ Ç¥±â)
<°ËÃâ ¹ÝÀÀ¿¡ ÇÊ¿äÇÑ °Í>
- ½Ç½Ã°£ PCR ¿ë ÁõÆøÀåÄ¡ ¹× Àü¿ëÆ©ºê
Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code TP900/TP960)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code TP700/TP760)
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System (Life Technologies »ç) µî
- Ź»ó ¿ø½É ºÐ¸®±â
- 200 ¥ìl, 20 ¥ìl, 10 ¥ìl °¢ ¸¶ÀÌÅ©·Î ÇÇÆê
- ¸¶ÀÌÅ©·Î ÇÇÆê¿ë ÆÁ (ÇÊÅÍÆÀ ±ÇÀå)
<»ùÇà Áغñ¿¡ ÇÊ¿äÇÑ °Í>
- ÇÙ»ê ÃßÃ⠽þà (EXTRAGEN II (Tosho(ÁÖ)) µî)
- Mutanolysin (Sigma-Aldrich, Code. M4782)
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-20 ¡É