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Lentivirus 생산용 enhancer 추가 (GMP 출시)

VirusGEN® LV Transfection Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Mirus
MIR 6760
VirusGEN® LV Transfection Kit
관련학술 구매하기
1 Kit (1 L cell culture)
가격문의   가격할인
05.02 ~ 06.30
virusgen-lv-transfection-kit-protocol.pdf
Mirus
MIR 6780
VirusGEN® SELECT LV Transfection Kit
관련학술 구매하기
1 Kit (10 L cell culture)
가격문의   virusgen-select-lv-transfection-kit-protocol.pdf
Mirus
MIR 6785
VirusGEN® SELECT LV Transfection Kit
관련학술 구매하기
1 Kit (50 L cell culture)
가격문의  
Mirus
MIR 6825-GMP
VirusGEN® GMP LV Transfection Kit
관련학술 구매하기
1 Kit (50 L cell culture)
가격문의   virusgen-gmp-lv-transfection-kit-protocol.pdf
Mirus
MIR 6620
TransduceIT™ Transduction Reagent
관련학술 구매하기
1 ㎖
가격문의   가격할인
05.02 ~ 06.30
transduceit-reagent-pds.pdf

*VirusGEN® SELECT 및 VirusGEN® GMP kit의 견적 및 구매는 반드시 다카라코리아 고객지원 (T. 02-2081-2510)으로 문의 바랍니다.
  • 높은 감염활성을 가지는 고품질의 Lentivirus 생산에 최적
  • HEK293 세포 배양 시스템에 최적 (adherent 및 suspension 배양 모두 적용)
  • 연구용 시약부터 전임상 단계, 임상용 GMP grade까지 라인업
제품설명
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent는 expression vector와 packaging plasmid를 HEK293 타입의 패키징 세포로 효율적으로 도입하여, AAV 또는 Lentivirus의 생산율을 높여주는 transfection 시약이다.
그 중에서도 본 VirusGEN® LV Transfection Kit 제품은 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent를 기반으로 plasmid 도입 효율을 높이기 위한 VirusGEN® LV Complex Formation Solution과 VirusGEN® LV Enhancer가 추가되어 Lentivirus의 효율적인 생산을 위해 최적화된 제품이다.
VirusGEN® SELECT LV Transfection Kit는 전임상 연구 및 공정 개발에서 필요한 대규모 바이러스 생산을 위한 최적의 시약으로 간편하고 비용 효율적인 실험 프로세스를 제공한다. 또한 전임상용 바이러스 벡터 제작을 위한 transfection 시약으로 사용할 수 있도록 품질 보증 시험을 완료하였다.
[Example Certificate of Origin (PDF) | Example Certificate of Analysis (PDF) | Example BSE TSE Statement (PDF)])
따라서, 임상 시험 또는 상업적인 바이러스 생산을 위해서는 VirusGEN® GMP LV Transfection Kit를 사용할 수 있다.


그림1. 타사대비 높은 Lentivirus functional titer
Suspension 형태로 배양한 Freestyle 293-F세포 (FreeStyle F17 Medium에서 배양)(A)와 Adherent 형태로 배양한 293T/17세포(B)에 Trans IT-VirusGEN® Transfection Reagent (reagent : DNA (vol : wt) = 3 : 1), 타사 B4 (2:1)(A), 3:1 (B), 타사 B5 (2:2:1 (A) 또는 3:3:1 (B)), 25 kDa PEI (4:1, Polysciences) 으로 transfection 하였다.
이때 pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ transfer vector 와 Lentivirus Packaging Mix powered by MISSION® (1:1 ratio, 1 µg/ml)을 이용하였다. Transfection 후 세포 배양 상등액을 회수하여 0.45 µm filtering 후, 293T/17 cell에 8 µg/ml TransduceIT™로 transduction하였다. 감염 72시간 후에 GFP 발현을 유세포측정기로 측정하여 functional titer를 확인하였다.
*Functional titer는 GFP 발현세포가 20% 미만인 virus 희석액으로부터 측정하였고, error bar는 3반복 실험군의 표준편차이다.


그림 2. TransIT-VirusGEN® Reagent, VirusGEN® LV Transfection Kit - 타사 제품과의 생산효율 비교
TransIT-ViruGEN® Transfection Reagent, VirusGEN® LV Transfection Kit, A제품 3, C제품 1을 이용하여 lentivirus의 생산 능력을 비교하였다. Expi293 Expression Media (Thermo Fisher Scientific)에서 배양한 Expi293F cells (Thermo Fisher Scientific)에 plasmid set (A. pALD-Lenti EGFP-A transfer vector, pALD-VSV-G-A, pALD-Rev-A와 pALD-GagPol-A packaging vectors (DNA비율 3:0.5:0.5:2, Aldevron), B. pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP transfer vector (Millipore Sigma), ViraSafe Pantropic Packaging mix (pRSV-Rev, pCMV-VSV-G, pCgpV, CellBio Lab) DNA비율 3:0.5:0.5:2)을 유전자 도입하고 바이러스를 회수하였다. 회수한 바이러스를 293T/17세포에 감염시키고 72시간 후에 GFP의 발현을 확인하여 역가를 측정하였다.
그 결과, TransIT-VirusGEN® Reagent, VirusGEN® LV Transfection Kit를 이용했을 때 더 많은 역가의 lentivirus를 생산할 수 있었고, 특히 VirusGEN® LV Transfection Kit를 이용하였을 때 가장 많은 양의 lentivirus를 생산할 수 있었다.
보존
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent : -10~-30℃ 보존
VirusGEN® LV Enhancer : 2~10℃
VirusGEN® LV Complex Formation Solution : 2~10℃
(SELECT, GMP 모두 동일)
관련제품
- Tat-independent Lentivirus system
   : LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV Vector)
   : LVpro Packaging Mix (pLVpro-EF1α Vector)
   : LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV-ZsGreen1 Vector)
- Mix & Spin 초간단 농축: Lenti-X™ Concentrator
- 고효율 감염을 위한 Lentivirus transduction enhancer
   : RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment)
   : RetroNectin® GMP grade (Recombinant Human Fibronectin Fragment CH-296)
- 최적의 Lentivirus 생산을 위한 제품 선택가이드 (링크)

Keyword :

효율증대를 위한 특수도입시약
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고역가의 AAV, Lentivirus 생산을 위한 (GMP 출..
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