※ RetroNectin® GMP grade (Code T202) 제품 주문시
전용 주문서를 작성하여 다카라코리아(
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※ 동결건조 형태의 RetroNectin® GMP grade (Code T201, 종매)이 solution 형태 (Code T202) 로 대체되었습니다.
- 최고의 Transduction enhancer : Lentivirus, Retrovirus의 유전자 도입 효율 극대화
- Low toxicity for cells : Polybrene, Protamine 대비 낮은 독성
- Enhanced T cell expansion : 기존 T cell 확대배양법 대비 압도적인 T cell 확대배양 가능 (CAR-T cell 연구에 최적)
제품설명
RetroNectin®, Recombinant Human Fibronectin CH-296은 Human fibronectin 중 기능을 가진 3개 단백질 조각 (① Cell-binding domain (C-domain, VLA-5와 결합),
② Heparin-binding domain (H-domain, virus 결합), ③ CS-1 (VLA-4 결합))으로 이루어진 재조합 단백질이다(그림 1). Target cell이 VLA-4를 발현하면 CS-1 부위와,
VLA-5를 발현하면 Cell-binding domain과 각각 결합하게 된다. 한편, Lenti/Retrovirus는 Heparin-binding domain에 결합하여, 세포와 virus가 물리적으로
가까워져 유전자 도입 효율이 극적으로 증가한다.
RetroNectin® GMP (Code T202)는 GMP grade의 RetroNectin®으로 GMP에 관한 가이드라인에 따라 제조 및 품질 관리되고 있다. 따라서 연구용으로 판매되는
RetroNectin® (Code T100A/B)보다 고품질로 유전자치료나 세포 조제 등의 임상 연구에 사용 가능하다.
[제품 원리 동영상]
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Figure 1. Hypothesized Mechanism of Action of RetroNectin®. RetroNectin Reagent is a recombinant human fibronectin fragment
that contains three functional domains: the (1) cell-binding domain (C-domain), (2) the heparin-binding domain (H-domain), and the (3) CS-1 sequence.
RetroNectin® Reagent enhances lentiviral- and retroviral-mediated gene transduction by aiding the co-localization of target cells and viral particles.
Specifically, virus particles bind RetroNectin® Reagent via interaction with the H-domain, and target cells bind mainly through the interaction of cell
surface integri n receptors VLA-5 and/or VLA-4 with the fibronectin C-domain and CS-1 sites, respectively. By facilitating close physical proximity,
RetroNectin® Reagent can enhance viral-mediated gene transfer to target cells expressing integrin receptors VLA-4 and/or VLA-5.
그림 2. 다양한 줄기세포에 대한 Retrovirus의 유전자 도입 효율 비교. 대표적인 Transduction enhancer인 Polybrene, Protamine과 RetroNectin®을
사용한 유전자 도입 효율 비교 결과, RetroNectin®이 다양한 줄기세포에 대해 가장 높은 유전자 도입효율을 나타내었다.
표 1. RetroNectin®을 사용한 Hematopoietic stem cell 유래 세포에 대한 유전자 도입 효율. RetroNectin®을 사용하면 일반적으로
hard-to-transfection cell로 알려진, Hematopoietic stem cell 유래 세포에 대해서도 높은 효율로 유전자 도입이 가능하다
그림 3. RetroNectin®을 사용한 효율적인 iPS generation. Human iPS Cell Generation All-in-One Vector (Code 3671)를 RetroNectin® 및 Polybrene을
사용하여 인간 피부 섬유아세포 (NHDF-Ad)에 유전자 도입 후 iPS 세포 콜로니 수 측정한 결과, RetroNectin®을 사용하면 효율적인 iPS generation이 가능하다.
보존
| RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment) |
- 20℃ |
| RetroNectin® Dish (35 mm diameter Dish) (Code T110A) |
4℃ |
| RetroNectin®GMP grade (Recombinant Human Fibronectin Fragment CH-296) |
- 30℃ 이하 |
형상
| RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment) (Code T100A) |
0.5 ㎎ (0.5 ㎖) |
| RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment) (Code T100B) |
2.5 ㎎ (2.5 ㎖) |
| RetroNectin® Dish (35 mm diameter Dish) (Code T110A) |
10 dishes |
| RetroNectin® GMP grade (Recombinant Human Fibronectin Fragment CH-296) |
2.5 ㎎ (2.5 ㎖) |
주의 사항
무균 환경에서 작업하십시오. 용해 후 RetroNectin® 용액은 실온에 두고 12시간 이내에 사용하시고 용해된 RetroNectin® 용액의 재사용은 피하십시오.
비고
RetroNectin®은 Lenti/Retrovirus의 유전자 도입 효율 증가뿐만 아니라, T cell의 확대배양에도 적용 가능한 것이 확인되었다. 일반적인 T cell
확대 배양은 배양 plate에 Anti-CD3 antibody (OKT3)의 coating과 세포배양액에 IL-2를 첨가하여 실시한다. RetroNectin®은 Anti-CD3 antibody와
함께 coating하여, 기존의 확대 배양법 대비 약 1.5배 이상 확대 배양 가능하며, 높은 Naive T cell 비율을 유지하는 특징으로, CAR-T cell 연구에 Gold standard로 사용되고 있다.
License Notice : [L9, M62]
