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Gene transfer (virus)
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Adeno-Associated Virus (AAV)
> AAV Freeze-thaw extraction solution
기존의 AAV 추출 방법으로 정제까지 4시간 내 완료
AAV Freeze-thaw extraction solution
제조사
제품코드
제품명
용량
가격
(부가세별도)
비고
사용자매뉴얼
Takara
6679
AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
20 ㎖ *2
(Package)
258,000원
Takara
6678
AAVpro® Purification Pack Maxi (All Serotypes)
4회
(Package)
761,000원
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다양한 serotype의 AAV 추출에 적용 가능
높은 recovery 효율
Ultracentrifugation과 같은 복잡한 과정 불필요
AAVpro
®
Purification Pack Maxi (All Serotypes) (Code 6678)과 함께 사용하면, 추출부터 정제까지 4시간 내 완료
제품 설명
Adeno-Associated Virus (AAV)는 분열, 비분열 세포에 유전자 도입이 가능하며, 특히 비분열 세포에서는 장기간 유전자 발현이 가능하다. 또한, 면역원성 (immune response)이 낮아
in-vivo
실험에 최적이다. 이러한 AAV를 실험 동물에 도입할 때에는, packaging cell과 배양 배지로부터 유래한 불순물들을 제거해야 한다.
AAVpro
®
Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)는 harvest 직후 혹은 frozen 상태의 AAV packaging cell로부터 Freeze-thaw 방식으로 AAV를 추출해내기 위한 시약이다. Packaging cell을 본 시약으로 suspension한 후 단 한번의 freeze-thaw 과정으로 다양한 serotype의 AAV를 효과적으로 추출할 수 있다.
AAVpro
®
Purification Pack Maxi (All Serotypes) (Code 6678)와 함께 사용하면 ultracentrifugation과 같은 복잡한 과정 없이, 4시간 내 간편하게 정제 및 농축된 AAV를 얻을 수 있다.
제품 성능 확인
1) AAV의 정제 및 순도 측정
ZsGreen1 형광단백질을 발현하는 각 serotype의 AAV (AAV1, AAV2, AAV5, AAV6)를 packaging 했으며, AAVpro
®
Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) (Code 6679)로 바이러스를 추출한 뒤 AAVpro
®
Purification Pack Maxi (All Serotypes) (Code 6678)로 정제하였다. 이렇게 정제된 AAV는
AAVpro
®
Titration Kit (for Real Time PCR) (Code 6233)
로 역가를 측정하여, 1X10
9
vg/lane 으로 SDS-PAGE를 수행하였다.
그 결과, 각 serotype 별 모든 AAV에서 AAV capsid protein인 VP1, VP2, VP3 band를 확인하였다.
2) 정제된 AAV의 감염 효율 비교
1)에서 얻은 정제된 serotype 별 AAV를 293T cell과 HeLa cell에 각각 transduction 한 후 감염 효율을 확인하였다. 정제한 AAV를 각 세포에 10,000 vg/cell (AAV1, AAV2) 혹은 100,000 vg/cell (AAV5, AAV6)로 감염시킨 3일 후 flow cytometry로 분석한 결과, 본 제품을 이용해 정제한 후에도 감염 능력을 유지하고 있음을 확인하였다.
내용
AAVpro Freeze-Thaw Extraction Buffer (All serotypes)
20 ㎖ X 2
관련제품
Keyword : AAV,adeno-associatedvirus,Freeze-thaw,freezethaw,in-vivo,invivo,invivo,인비보,extraction,추출,purification,정제,ultracentrifuge,invivo,immunogenicity,면역원성,동물실험,실험동물
Adeno-Associated Virus (AAV)
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